פאָרעדירעקט רט-קפּקר קיט
קיט באַשרייַבונג:
◮פֿאַר רנאַ דירעקט פאַקטיש-צייט אַמפּלאַפאַקיישאַן פון ווישער זאַמלונגען אָן רנאַ רייניקונג פּראַסעסאַז.דעם קיט קאַמפּליץ די qRT-PCR סייקאַלז אין אַ שעה.די ענזיים מישן איז אַ אָפּטימיזעד צונויפגיסן פון פאַרקערט טראַנסקריפּטאַסע, הייס-אָנהייב טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע, רנאַסע ינכיבאַטער.דער רעאַקציע באַפער כּולל אַלע די פארלאנגט קאַמפּאָונאַנץ, אַרייַנגערעכנט אָפּטימיזעד באַפער קאַמפּאָונאַנץ, Mg2+, דוטפּ און דנטפּס.
באַשרייַבונג
ForeDirect RT-qPCR קיט איז דיזיינד פֿאַר רנאַ דירעקט פאַקטיש-צייט אַמפּלאַפאַקיישאַן פון ווישער זאַמלונגען אָן רנאַ רייניקונג פּראַסעסאַז.דעם קיט קאַמפּליץ די qRT-PCR סייקאַלז אין אַ שעה.די ענזיים מישן איז אַ אָפּטימיזעד צונויפגיסן פון פאַרקערט טראַנסקריפּטאַסע, הייס-אָנהייב טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע, רנאַסע ינכיבאַטער.דער רעאַקציע באַפער כּולל אַלע די פארלאנגט קאַמפּאָונאַנץ, אַרייַנגערעכנט אָפּטימיזעד באַפער קאַמפּאָונאַנץ, Mg2+, דוטפּ און דנטפּס.
ספּעסאַפאַקיישאַנז
100ט
קיט קאַמפּאָונאַנץ
| נוקלעיק זויער מעלדונג אַגענט |
| רנאַ פּראַטעקטיוו |
| 2× רט-קפּקר באַפער |
| ענזיים געמיש (Taq&M-MLV) |
| אינסטרוקציעס |
PCR אַפּפּליקאַטיאָן
1. אַמאָל די פּקר אָפּרוף טובז האָבן שוין בעקיצער סענטריפוגעד, שטעלן זיי אין די מוסטער טאַנק פון אַמפּלאַפאַקיישאַן קיילע.
2. טערמאַל פּראָטאָקאָל
| טרעפּל | טעמפּעראַטור | צייַט | סייקאַלז | |
| 1 | פאַרקערט טראַנסקריפּציע | 50℃ | 15 מינוט | 1 |
| 2 | פאַר-דענאַטוראַטיאָן | 95℃ | 1 מין | 1 |
| 3 | דענאַטוראַטיאָן | 95℃ | 10 סעקונדעס | 42 |
| 4 | אַנאַנאַל / פאַרלענגערונג | 60℃ | 30 סעקונדעס | |
נאטיץ:פלורעסאַנט סיגנאַל איז דיטעקטאַד מיד נאָך די פאַרלענגערונג שריט פון יעדער ציקל.
3. נאָך באַשטעטיקן, ראַטעווען די טעקע און לויפן די אָפּרוף פּראָגראַם.
אַפּערייטינג סטעפּס
איידער די רייידזשאַנט צוגרייטונג, אַלע די רייידזשאַנץ אין די קיט זאָל זיין טאָד אין צימער טעמפּעראַטור און דזשענטלי געמישט.
רעאַגענט צוגרייטונג
1. צוגרייטן די נוקלעיק זויער ריליס מיקס
| קאָמפּאָנענט | באַנד פּער מוסטער אָדער קאָנטראָל |
| נוקלעיק זויער מעלדונג אַגענט | 5μל |
| רנאַ פּראַטעקטיוו | 0.5 μל |
2. צוגרייטן די רעאַקטיאָן מיקס
| קאָמפּאָנענט | באַנד פּער מוסטער אָדער קאָנטראָל |
| 2× רט-קפּקר באַפער | 15 μל |
| ענזיים געמיש (Taq&M-MLV) | 1.5 μל |
| פּרימערס און פּראָבעס | 1μל |
סטאָרידזש און פּאָליצע לעבן
-די קיט זאָל זיין סטאָרד בייַ -20± 5℃.די גילטיקייַט צייַט איז 12 חדשים.
- ויסמיידן ריפּיטיד פרירן-טאָ סייקאַלז (<5 סייקאַלז).
