כייַע גאַנץ רנאַ אפגעזונדערטקייט קיט גאַנץ רנאַ יקסטראַקשאַן און רייניקונג קיץ פֿאַר כייַע געוועבן און צעל
קיט באַשרייַבונג:
געשווינד און יפישאַנטלי עקסטראַקט הויך-ריינקייט און הויך-קוואַליטעט גאַנץ רנאַ פון פאַרשידן כייַע געוועבן.
ניט דאַרפֿן צו זאָרג וועגן רנאַ דערנידעריקונג.די גאנצע סיסטעם איז RNase-Free
יפעקטיוולי באַזייַטיקן דנאַ ניצן דנאַ-רייניקונג זייַל
אַראָפּנעמען דנאַ אָן אַדינג דנאַסע
פּשוט - אַלע אַפּעריישאַנז זענען געענדיקט אין צימער טעמפּעראַטור
שנעל - אָפּעראַציע קענען זיין געענדיקט אין 30 מינוט
זיכער - קיין אָרגאַניק רייידזשאַנט געניצט
הויך ריינקייַט-OD260/280≈1.8-2.1
קיץ דיסקריפּשאַנז
50 פּרעפּס, 200 פּרעפּס
דעם קיט ניצט דיומדריי זייַל און פאָרמולעדעוועלאָפּעד דורך אונדזער פירמע, וואָס קענען עקסטראַקט הויך-ריינקייט און הויך-קוואַליטעט גאַנץ רנאַ פון פאַרשידן כייַע געוועבן מיט הויך עפעקטיווקייַט. עס גיט אַן עפעקטיוו דנאַ-רייניקונג קאָלום, וואָס קענען לייכט צעטיילן און אַדסאָרב גענאָמיק דנאַ פון די סופּערנאַטאַנט און געוועב ליסאַטע, פּשוט און צייַט-שפּאָרן;RNA-בלויז קאָלום קענען יפישאַנטלי בינדן רנאַ און קענען זיין פּראַסעסט סיימאַלטייניאַסלי מיט אַ יינציק פאָרמולע פילע סאַמפּאַלז.
די גאנצע סיסטעם איז רנאַסע-פֿרייַ, אַזוי אַז די יקסטראַקטיד רנאַ איז נישט דיגריידיד;באַפער RW1, Buffer RW2 באַפער וואַשינג סיסטעם, אַזוי אַז די באקומען רנאַ איז פריי פון פּראָטעין, דנאַ, יאָן און אָרגאַניק קאַמפּאַונד פאַרפּעסטיקונג.
קיט קאַמפּאָונאַנץ
| כייַע גאַנץ רנאַ אפגעזונדערטקייט קיט | ||
| קיט קאַמפּאָונאַנץ | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ט | 200 ט | |
| באַפער RL1* | 25 מל | 100 מל |
| באַפער RL2 | 15 מל | 60 מל |
| באַפער RW1* | 25 מל | 100 מל |
| באַפער RW2 | 24 מל | 96 מל |
| RNase-Free ddH2O | 10 מל | 40 מל |
| RNA-בלויז זייַל | 50 | 200 |
| דנאַ-רייניקונג זייַל | 50 | 200 |
| אינסטרוקציע מאַנואַל | 1 שטיק | 1 שטיק |
פּראָדוקט אינפֿאָרמאַציע
| פֿאָרמאַט | ספּין זייַל | רייניקונג קאָמפּאָנענט | פאָרגענעם זייַל, רעאַגענט |
| פלאַקס | 1-24 סאַמפּאַלז | צייט פֿאַר צוגרייטונג | ~30 מינוט (24 סאַמפּאַלז) |
| סענטריפיוזש | שרייַבטיש סענטריפוגע | פּיראָליסיס צעשיידונג | סענטריפוגאַל צעשיידונג |
| מוסטער | כייַע געוועב;צעל | סאַמפּאַלז סומע | געוועב: 10-20 מג;צעל: (1-5) × 106 |
| עלוטיאָן באַנד | 50-200 μל | מאַקסימום לאָודינג באַנד | 850 μל |
פֿעיִקייטן & אַדוואַנטידזשיז
■ ניט דאַרפֿן צו זאָרג וועגן רנאַ דערנידעריקונג;די גאנצע סיסטעם איז RNase-Free
■ יפעקטיוולי באַזייַטיקן דנאַ-ניצן דנאַ-רייניקונג קאָלום
■ אַראָפּנעמען דנאַ אָן אַדינג דנאַסע
■ פּשוט-אַלע אַפּעריישאַנז זענען געענדיקט אין צימער טעמפּעראַטור
■ שנעל אָפּעראַציע קענען זיין געענדיקט אין 30 מינוט
■ זיכער-קיין אָרגאַניק רייידזשאַנט פארלאנגט
■ הויך ריינקייַט -OD260/280≈1.8-2.1
קיט אַפּלאַקיישאַן
עס איז פּאַסיק פֿאַר די יקסטראַקשאַן און רייניקונג פון גאַנץ רנאַ פון אַ פאַרשיידנקייַט פון פריש אָדער פאַרפרוירן כייַע געוועבן אָדער געבילדעטער סעלז.
פּראָדוקט פּאַראַמעטערס
■ דאַונסטרים אַפּלאַקיישאַנז: ערשטער-סטראַנד קדנאַ סינטעז, RT-PCR, מאָלעקולאַר קלאָונינג, נאָרדערן בלאָט, אאז"ו ו.
■ סאַמפּאַלז: כייַע געוועבן, געבילדעטער סעלז
■ דאָוסאַדזש: געוועב 10-20 מג, סעלז (2-5) × 106
■ מאַקסימום דנאַ ביינדינג קאַפּאַציטעט פון רייניקונג זייַל: 80 μג
■ ילושאַן באַנד: 50-200 μל
דיאַגראַמע
כייַע גאַנץ רנאַ אפגעזונדערטקייט קיט באהאנדלט 20 מג
פריש מויז סאַמפּאַלז, נעמען 5% פּיוראַפייד גאַנץ רנאַ 1% אַגאַר
גלייקאָגעל עלעקטראָפאָרעסיס
1: מילץ 2: ניר
3: לעבער 4: הארץ
סטאָרידזש און פּאָליצע לעבן
די קיט קענען זיין סטאָרד פֿאַר 24 חדשים אין צימער טעמפּעראַטור (15-25 ℃) אָדער 2-8 ℃ פֿאַר מער צייט.באַפער RL1 קענען זיין סטאָרד ביי 4 ℃ פֿאַר 1 חודש נאָך אַדינג β-מערקאַפּטאָעטאַנאָל (אַפּשאַנאַל).
ציטירטע ארטיקלען
1.אויב:18.808:זשענג, ק., קין, עף, לואָ, ר., עט על.mRNA-לאָודיד ליפּיד-ווי נאַנאָפּאַרטיקלעס פֿאַר לעבער באַסע עדיטינג דורך די אָפּטימיזאַטיאָן פון סענטראַל קאָמפּאָסיטע פּלאַן.אַדוו.פונקציאָנירן.מאטער.2021, 31, 2011068.דאָי:10.1002/אַדפם.202011068.
2.אויב:18.187:ער רענטגענ, האָנג וו, יאַנג דזש, עט על.ספּאַנטייניאַס אַפּאָפּטאָסיס פון סעלז אין טעראַפּיוטיק סטעם צעל צוגרייטונג יגזיסץ יממונאָמאָדולאַטאָרי יפעקץ דורך מעלדונג פון פאָספאַטידילסערינע.סיגנאַל טראַנסדוקט ציל טער.14 יולי 2021; 6(1):270.דאָי: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.אויב:17.97:דאַי ז, ליו ה, ליאַו דזש, עט על.N7-מעטהילגואַנאָסינע טרנאַ מאָדיפיקאַטיאָן ענכאַנסיז אָנקאָגעניק מרנאַ איבערזעצונג און פּראַמאָוץ ינטראַהעפּאַטיק טשאָלאַנגיאָקאַרסינאָמאַ פּראַגרעשאַן.מאָל צעל.2021 יולי 29: S1097-2765 (21) 00555-4.דאָי: 10.1016/דזש.מאָלסעל.2021.07.003.
4.אויב:9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, עט על.Mettl14-מעדיאַטעד m6A מאָדיפיקאַטיאָן פאַסילאַטייץ לעבער רידזשענעריישאַן דורך אָנהאַלטן ענדאָפּלאַסמיק רעטיקולום כאָומאָסטאַסיס.צעל מאָל גאַסטראָענטעראָל העפּאַטאָל.2021;12(2):633-651.דאָי: 10.1016/דזש.דזשקםגה.2021.04.001.
רנאַ יזאָלאַטיאָן קיץ פֿאַר אנדערע מוסטער מקוריםזענען בנימצא:
צעל, פאַבריק, וויראַל, בלוט, אאז"ו ו.
רנאַ איז נישט יקסטראַקטיד אָדער רנאַ ייעלדס זענען נידעריק
עס זענען אָפט אַ פאַרשיידנקייַט פון סיבות וואָס ווירקן אָפּזוך עפעקטיווקייַט, אַזאַ ווי: געוועב מוסטער רנאַ אינהאַלט, אופֿן פון אָפּעראַציע, ילושאַן באַנד, עטק.
1. אייז וואַנע אָדער קריאָגעניק (4 °C) סענטריפוגאַטיאָן איז דורכגעקאָכט בעשאַס אָפּעראַציע.
רעקאָמענדאַציע: אַרבעטן אין צימער טעמפּעראַטור (15-25 ° C) איבער דער גאנצער פּראָצעס, טאָן ניט אייז וואַנע און סענטריפודזש ביי נידעריק טעמפּעראַטורעס.
2. ימפּראַפּער מוסטער פּרעזערוויישאַן אָדער יבעריק מוסטער סטאָרידזש צייַט.
רעקאָמענדאַציע: קראָם סאַמפּאַלז בייַ -80 °C אָדער פרירן אין פליסיק ניטראָגען און ויסמיידן ריפּיטיד פרירן-טאָ נוצן;פּרובירן צו נוצן פריש געוועב אָדער געבילדעטער סעלז פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן.
3. ניט גענוגיק מוסטער ליסיס.
רעקאָמענדאַציע: ווען כאָומאַדזשאַנייזינג געוועב, ענשור אַז די געוועב איז גענוג כאָומאַדזשאַנייזד און אַז די געוועב סעלז זענען גענוג שפּאַלטן צו דערקלערן די מעלדונג פון רנאַ.
4. די עלוענט איז נישט מוסיף ריכטיק.
רעקאָמענדאַציע: באַשטעטיקן אַז RNase-Free ddH2אָ איז מוסיף דראָפּווייז צו די מיטן פון די רייניקונג זייַל מעמבראַנע.
5. די ריכטיק באַנד פון אַבסאָלוט עטאַנאָל איז נישט צוגעגעבן צו Buffer RL2 אָדער Buffer RW2.
רעקאָמענדאַציע: גיי די ינסטראַקשאַנז, לייגן די ריכטיק באַנד פון אַבסאָלוט עטאַנאָל צו Buffer RL2 און Buffer RW2 און מישן געזונט איידער איר נוצן די קיט.
6. געוועב מוסטער דאָוסאַדזש איז נישט צונעמען.
רעקאָמענדאַציע: ניצן 10-20 מג פון געוועב אָדער (1-5) × 106סעלז פּער 500 μל באַפער RL1, ווייַל יבעריק געוועב נוצן קענען רעזולטאַט אין רידוסט רנאַ יקסטראַקשאַן.
7. ימפּראַפּער ילושאַן באַנד אָדער דערענדיקט ילושאַן.
רעקאָמענדאַציע: די ילושאַן באַנד פון די רייניקונג זייַל איז 50-200 μל;אויב די ילושאַן ווירקונג איז נישט באַפרידיקנדיק, עס איז רעקאַמענדיד צו פאַרברייטערן די אָרט טעמפּעראַטור פּלייסמאַנט צייט נאָך אַדינג פּרעהעאַטעד RNase-Free ddH2אָ, למשל פֿאַר 5-10 מינוט.
8.טהע רייניקונג זייַל האט עטאַנאָל רעזאַדו נאָך באַפער רוו2 וואַש.
רעקאָמענדאַציע: אויב עס איז עטאַנאָל רעזאַדו נאָך וואַשינג באַפער רוו 2, ליידיק רער סענטריפוגיישאַן פֿאַר 1 מינוט, די צייט פֿאַר די ליידיק רער סענטריפוגיישאַן אָפּעראַציע קענען זיין געוואקסן צו 2 מינוט, אָדער די רייניקונג זייַל קענען זיין שטעלן אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר 5 מינוט צו אַדאַקוואַטלי באַזייַטיקן די ריזידזשואַל עטאַנאָל.
פּיוראַפייד רנאַ איז דיגריידיד
די קוואַליטעט פון די פּיוראַפייד רנאַ איז שייַכות צו סיבות אַזאַ ווי די פּרעזערוויישאַן פון די מוסטער, רנאַסע קאַנטאַמאַניישאַן, און מאַניפּיאַליישאַן, עטק.
1. געוועב סאַמפּאַלז זענען נישט געהאלטן אין צייט.
רעקאָמענדאַציע: אויב געוועב סאַמפּאַלז אָדער סעלז זענען נישט געניצט אין אַ בייַצייַטיק שטייגער נאָך זאַמלונג, מיד קריאָפּערווע ביי -80 °C אָדער פליסיק ניטראָגען.צו עקסטראַקט רנאַ, נוצן אַ ניי גענומען געוועב אָדער צעל מוסטער ווען מעגלעך.
2. ריפּיטיד פרירן-טאָווינג פון געוועב סאַמפּאַלז.
רעקאָמענדאַציע: ווען סטאָרינג געוועב סאַמפּאַלז, עס איז בעסטער צו שנייַדן זיי אין קליין ברעקלעך פֿאַר פּרעזערוויישאַן, און באַזייַטיקן איינער פון די ברעקלעך ווען איר נוצן זיי צו ויסמיידן ריפּיטיד פרירן-טאָווינג פון די מוסטער און דערנידעריקונג פון רנאַ.
3. רנאַסע איז באַקענענ אָדער ניט ווערינג דיספּאָוזאַבאַל גלאַווז, מאַסקס, אאז"ו ו בעשאַס די אָפּעראַציע.
רעקאָמענדאַציע: רנאַ יקסטראַקשאַן יקספּעראַמאַנץ זענען בעסטער געטאן אין באַזונדער רנאַ מאַניפּיאַליישאַן רומז און די טיש איז קלירד איידער דער עקספּערימענט.
טראָגן דיספּאָוזאַבאַל גלאַווז און מאַסקס בעשאַס דער עקספּערימענט צו מינאַמייז רנאַ דערנידעריקונג געפֿירט דורך די הקדמה פון רנאַסע.
4. רעאַגענץ זענען קאַנטאַמאַנייטאַד מיט רנאַסע בעשאַס נוצן.
רעקאָמענדאַציע: פאַרבייַטן מיט אַ נייַע אַנימאַל גאַנץ רנאַ יסאָלאַטיאָן קיט פֿאַר פֿאַרבונדענע יקספּעראַמאַנץ.
5. די סענטריפודזש טובז, עצות, עטק געניצט אין רנאַ מאַניפּיאַליישאַן זענען קאַנטאַמאַנייטאַד מיט רנאַסע.
רעקאָמענדאַציע: באַשטעטיקן אַז די סענטריפודזש טובז, עצות, פּיפּעטטעס, עטק געניצט אין רנאַ יקסטראַקשאַן זענען אַלע רנאַסע-פֿרייַ.
פּיוראַפייד באקומען רנאַ אַפעקץ דאַונסטרים יקספּעראַמאַנץ
רנאַ פּיוראַפייד דורך די רייניקונג זייַל, אויב די זאַלץ ייאַנז, פּראָטעין צופרידן איז אויך גרויס, וועט ווירקן די דאַונסטרים עקספּערימענט, אַזאַ ווי: פאַרקערט טראַנסקריפּציע, נאָרדערן בלאָט עט על.
1. די elutioned רנאַ האט זאַלץ יאָן רעזאַדוז.
רעקאָמענדאַציע: באַשטעטיקן אַז די ריכטיק באַנד פון עטאַנאָל איז צוגעלייגט צו Buffer RW2 און דורכפירן 2 רייניקונג זייַל וואַשיז ביי די סענטריפוגאַל גיכקייַט וואָס איז אנגעוויזן פֿאַר אָפּעראַציע;אויב עס איז קיין זאַלץ יאָן רעזאַדו, לאָזן די רייניקונג זייַל צו Buffer RW2 פֿאַר 5 מינוט אין צימער טעמפּעראַטור און דורכפירן סענטריפוגיישאַן צו מאַקסאַמייז די באַזייַטיקונג פון זאַלץ קאַנטאַמאַניישאַן.
2. עטאַנאָל רעזאַדו אין ילוטיאָן רנאַ.
רעקאָמענדאַציע: באַשטעטיקן אַז נאָך באַפער RW2 וואַשינג, דורכפירן די ליידיק רער סענטריפוגיישאַן אָפּעראַציע מיט די סענטריפוגיישאַן גיכקייַט וואָס איז אנגעוויזן פֿאַר אָפּעראַציע, פאַרגרעסערן די צייט פון די ליידיק רער סענטריפוגיישאַן אָפּעראַציע צו 2 מינוט אויב עס איז נאָך עטאַנאָל רעזאַדו, אָדער לאָזן עס אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר 5 מינוט נאָך די ליידיק רער סענטריפוגיישאַן צו מאַקסאַמייז די באַזייַטיקונג פון עטאַנאָל רעזאַדו.
