טשיינאַ מאַנופאַקטורער פֿאַר 2 × קאַנסאַנטרייטאַד פּרעמיקס פֿאַר אַנפּייערד מוסטער פאַקטיש-צייט קוואַנטיטאַטיווע פּקר דירעקט מולטיפּלעקס זאָנד קפּקר מיקס פּלוס ו
די אָרגאַניזאַציע האלט אויף דעם פּראָצעדור באַגריף "וויסנשאפטלעכע פאַרוואַלטונג, הויך קוואַליטעט און עפעקטיווקייַט פּרימאַסי, קוינע העכסטע פֿאַר טשיינאַ מאַנופאַקטורער פֿאַר 2 × קאַנסאַנטרייטאַד פּרעמיקס פֿאַר ונפּוריפיעד מוסטער פאַקטיש-צייט קוואַנטיטאַטיווע פּקר דירעקט מולטיפּלעקס פּראָבע Qpcr Mix Plus U, אונדזער געשעפט איז דעדאַקייטאַד צו געבן קאַסטאַמערז באַטייַטיק און זיכער שפּיץ קוואַליטעט פּראָדוקטן צו אַגרעסיוו פּרייַז, מאכן יעדער סערוויס קונה צופרידן.
די אָרגאַניזאַציע האלט אויף די פּראָצעדור באַגריף "וויסנשאפטלעכע פאַרוואַלטונג, הויך קוואַליטעט און עפעקטיווקייַט פּרימאַסי, קוינע העכסט פֿאַרטשיינאַ טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע און קפּקר, אונדזער פירמע האט שעפעדיק שטאַרקייַט און פארמאגט אַ פעסט און שליימעסדיק סאַלעס נעץ סיסטעם.מיר ווינטשן מיר קען פאַרלייגן געזונט געשעפט באציונגען מיט אַלע קאַסטאַמערז פון שטוב און אין אויסלאנד אויף דער באזע פון קעגנצייַטיק בענעפיץ.
פאַקטיש צייט פּקר אָנפאַנגער פּלאַן פּרינסאַפּאַלז
פאָרויס אָנפאַנגער און פאַרקערט אָנפאַנגער
פֿאַר פאַקטיש צייט פּקר, אָנפאַנגער פּלאַן איז זייער וויכטיק.פּרימערז זענען שייַכות צו די ספּעציפֿישקייט און עפעקטיווקייַט פון פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן, און קענען זיין דיזיינד מיט די פאלגענדע פּרינסאַפּאַלז:
- אָנפאַנגער לענג: 18-30 בפּ.
- גק אינהאַלט: 40-60%.
- טם ווערט: אָנפאַנגער פּלאַן ווייכווארג, אַזאַ ווי אָנפאַנגער 5, קענען געבן די טם ווערט פון די אָנפאַנגער.די טם וואַלועס פון די אַפּסטרים און דאַונסטרים פּרימערז זאָל זיין ווי נאָענט ווי מעגלעך.די טם כעזשבן פאָרמולע קענען אויך זיין געוויינט: טם = 4 °C (ג + C) + 2 °C (א + ה).ווען פּערפאָרמינג פּקר, אַ טעמפּעראַטור אונטער די אָנפאַנגער טם ווערט פון 5 °C איז בכלל אויסגעקליבן ווי די אַנילינג טעמפּעראַטור (די קאָראַספּאַנדינג פאַרגרעסערן אין די אַנילינג טעמפּעראַטור קענען פאַרגרעסערן די ספּעסיפיקייט פון די פּקר אָפּרוף).
- פּרימערז און PCR פּראָדוקטן:
- פּלאַן אָנפאַנגער פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקט לענג איז פּרעפעראַבלי 100-150בפּ.
- פּלאַן פּרימערז אין די צווייטיק סטראַקטשעראַל געגנט פון די מוסטער זאָל זיין אַוווידיד ווי פיל ווי מעגלעך.
- ויסמיידן די פאָרמירונג פון 2 אָדער מער קאַמפּלאַמענטשי באַסעס צווישן די 3′ ענדס פון אַפּסטרים און דאַונסטרים פּרימערז.
- אָנפאַנגער 3′ וואָקזאַל באַזע קענען ניט זיין פאָרשטעלן מיט 3 נאָך קאָנסעקוטיווע G אָדער C.
- די פּרימערז זיך קענען נישט האָבן קאַמפּלאַמענטשי סטראַקטשערז, אַנדערש אַ האַירפּין סטרוקטור וועט זיין געשאפן, אַפעקטינג פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן.
- ATCG זאָל זיין פונאנדערגעטיילט ווי יוואַנלי ווי מעגלעך אין די אָנפאַנגער סיקוואַנס, און די 3′ וואָקזאַל באַזע זאָל זיין אַוווידאַד ווי T.
אַפּפּענדיקס1: סיעל דירעקטRT-qPCR קיט קאָמפּאָנענטה העסאָפע פּאַק
1.צעל ליסיס לייזונג
צעל ליסיס לייזונג | |||
קיט קאַמפּאָונאַנץ (24 געזונט ליסיס סיסטעם / געזונט) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ט | 500 ט | ||
טיילאיך | באַפער קל | 20 מל | 100 מל |
פאָרעגענע פּראָטעאַסע פּלוס וו | 400 μל | קסנומקס מל × קסנומקס | |
באַפער סט | קסנומקס מל × קסנומקס | 10 מל | |
טיילוו | דנאַ מעקער | 400 μל | קסנומקס מל × קסנומקס |
רט מיקס | |
קיט קאַמפּאָונאַנץ (20 μל אָפּרוף סיסטעם) | DRT-01011-B1 |
200 ט | |
5× דירעקט רט מיקס | 800 μל |
RNase-Free ddH2O | 1.7 מל × 2 |
qPCR מיקס | ||
קיט קאַמפּאָונאַנץ (20 μל אָפּרוף סיסטעם) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ט | 1000 ט | |
2× דירעקט קפּקר מיקס-טאַקמאַן | קסנומקס מל × קסנומקס | 1.7 מל × 6 |
20× ROX רעפערענץ פאַרב | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 מל | 10 מל |
די אָרגאַניזאַציע האלט אויף דעם פּראָצעדור באַגריף "וויסנשאפטלעכע פאַרוואַלטונג, הויך קוואַליטעט און עפעקטיווקייַט פּרימאַסי, קוינע העכסטע פֿאַר טשיינאַ מאַנופאַקטורער פֿאַר 2 × קאַנסאַנטרייטאַד פּרעמיקס פֿאַר ונפּוריפיעד מוסטער פאַקטיש-צייט קוואַנטיטאַטיווע פּקר דירעקט מולטיפּלעקס פּראָבע Qpcr Mix Plus U, אונדזער געשעפט איז דעדאַקייטאַד צו געבן קאַסטאַמערז באַטייַטיק און זיכער שפּיץ קוואַליטעט פּראָדוקטן צו אַגרעסיוו פּרייַז, מאכן יעדער סערוויס קונה צופרידן.
טשיינאַ מאַנופאַקטורער פֿאַרטשיינאַ טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע און קפּקר, אונדזער פירמע האט שעפעדיק שטאַרקייַט און פארמאגט אַ פעסט און שליימעסדיק סאַלעס נעץ סיסטעם.מיר ווינטשן מיר קען פאַרלייגן געזונט געשעפט באציונגען מיט אַלע קאַסטאַמערז פון שטוב און אין אויסלאנד אויף דער באזע פון קעגנצייַטיק בענעפיץ.
פאַקטיש צייט פּקר אָנפאַנגער פּלאַן פּרינסאַפּאַלז
פאָרויס אָנפאַנגער און פאַרקערט אָנפאַנגער
פֿאַר פאַקטיש צייט פּקר, אָנפאַנגער פּלאַן איז זייער וויכטיק.פּרימערז זענען שייַכות צו די ספּעציפֿישקייט און עפעקטיווקייַט פון פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן, און קענען זיין דיזיינד מיט די פאלגענדע פּרינסאַפּאַלז:
- אָנפאַנגער לענג: 18-30 בפּ.
- גק אינהאַלט: 40-60%.
- טם ווערט: אָנפאַנגער פּלאַן ווייכווארג, אַזאַ ווי אָנפאַנגער 5, קענען געבן די טם ווערט פון די אָנפאַנגער.די טם וואַלועס פון די אַפּסטרים און דאַונסטרים פּרימערז זאָל זיין ווי נאָענט ווי מעגלעך.די טם כעזשבן פאָרמולע קענען אויך זיין געוויינט: טם = 4 °C (ג + C) + 2 °C (א + ה).ווען פּערפאָרמינג פּקר, אַ טעמפּעראַטור אונטער די אָנפאַנגער טם ווערט פון 5 °C איז בכלל אויסגעקליבן ווי די אַנילינג טעמפּעראַטור (די קאָראַספּאַנדינג פאַרגרעסערן אין די אַנילינג טעמפּעראַטור קענען פאַרגרעסערן די ספּעסיפיקייט פון די פּקר אָפּרוף).
- פּרימערז און PCR פּראָדוקטן:
- פּלאַן אָנפאַנגער פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקט לענג איז פּרעפעראַבלי 100-150בפּ.
- פּלאַן פּרימערז אין די צווייטיק סטראַקטשעראַל געגנט פון די מוסטער זאָל זיין אַוווידיד ווי פיל ווי מעגלעך.
- ויסמיידן די פאָרמירונג פון 2 אָדער מער קאַמפּלאַמענטשי באַסעס צווישן די 3′ ענדס פון אַפּסטרים און דאַונסטרים פּרימערז.
- אָנפאַנגער 3′ וואָקזאַל באַזע קענען ניט זיין פאָרשטעלן מיט 3 נאָך קאָנסעקוטיווע G אָדער C.
- די פּרימערז זיך קענען נישט האָבן קאַמפּלאַמענטשי סטראַקטשערז, אַנדערש אַ האַירפּין סטרוקטור וועט זיין געשאפן, אַפעקטינג פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן.
- ATCG זאָל זיין פונאנדערגעטיילט ווי יוואַנלי ווי מעגלעך אין די אָנפאַנגער סיקוואַנס, און די 3′ וואָקזאַל באַזע זאָל זיין אַוווידאַד ווי T.
אַפּפּענדיקס1: סיעל דירעקטRT-qPCR קיט קאָמפּאָנענטה העסאָפע פּאַק
1.צעל ליסיס לייזונג
צעל ליסיס לייזונג | |||
קיט קאַמפּאָונאַנץ (24 געזונט ליסיס סיסטעם / געזונט) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ט | 500 ט | ||
טיילאיך | באַפער קל | 20 מל | 100 מל |
פאָרעגענע פּראָטעאַסע פּלוס וו | 400 μל | קסנומקס מל × קסנומקס | |
באַפער סט | קסנומקס מל × קסנומקס | 10 מל | |
טיילוו | דנאַ מעקער | 400 μל | קסנומקס מל × קסנומקס |
רט מיקס | |
קיט קאַמפּאָונאַנץ (20 μל אָפּרוף סיסטעם) | DRT-01011-B1 |
200 ט | |
5× דירעקט רט מיקס | 800 μל |
RNase-Free ddH2O | 1.7 מל × 2 |
qPCR מיקס | ||
קיט קאַמפּאָונאַנץ (20 μל אָפּרוף סיסטעם) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ט | 1000 ט | |
2× דירעקט קפּקר מיקס-טאַקמאַן | קסנומקס מל × קסנומקס | 1.7 מל × 6 |
20× ROX רעפערענץ פאַרב | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 מל | 10 מל |
אינסטרוקציעס מאַנואַל: