סטעראַליזיישאַן פון פּייפּעט עצות און עפּ טובז, עטק.
1. צוגרייטן 0.1% (1 טויזנטסט) דעפּק (העכסט טאַקסיק מאַטעריע) מיט דייאַנייזד וואַסער, נוצן עס קערפאַלי אין אַ רויך קאַפּטער, און קראָם עס בייַ 4 ° C אַוועק פון ליכט;
דעפּק וואַסער איז ריין וואַסער באהאנדלט מיט דעפּק און סטעראַלייזד דורך הויך טעמפּעראַטור און הויך דרוק.טעסטעד צו זיין פריי פון רנאַסע, דנאַסע און פּראָטעינס.
2. שטעלן די פּיפּעטטע שפּיץ און עפּ רער אין 0.1% דעפּק, און ענשור אַז די פּיפּעטטע שפּיץ און עפּ רער זענען אָנגעפילט מיט 0.1% דעפּ.
3. באַשיצן פון ליכט, לאָזן שטיין, יבערנאַכטיק (12-24 שעה)
4. די קעסטל מיט די שפּיץ און עפּ רער דאַרף ניט זיין סאָוקט אין דעפּק.נאָך בעערעך רימוווינג די דעפּק וואַסער אין די שפּיץ אָדער עפּ רער, פּאַק עס און ייַנוויקלען עס.
5. 121 דיגריז סעלסיוס, 30מין
6. 180 דיגריז סעלסיוס, טרוקן פֿאַר עטלעכע שעה (בייַ מינדסטער 3 שעה)
באַמערקונג: אַ.טראָגן לייטעקס גלאַווז און מאַסקס ווען האַנדלינג דעפּק!ב, אָדער אָן דעפּק סטעראַליזיישאַן, 130 ℃, 90 מינוט אַוטאָקלאַוו (פילע לאַבאָראַטאָריעס הויך טעמפּעראַטור סטעראַליזיישאַן צוויי מאָל)
קאַנסידעריישאַנז פון רנאַ יקסטראַקשאַן
צוויי הויפּט פענאָמענאַ פון געוועב רנאַ אפגעזונדערטקייט דורכפאַל
רנאַ דערנידעריקונג און רעזאַדוז פון ימפּיוראַטיז אין געוועבן,וועגן דערנידעריקונג, לאָזן ס ערשטער קוק אין וואָס רנאַ יקסטראַקטיד פון געבילדעטער סעלז איז נישט לייכט דיגריידיד.עקסיסטינג רנאַ יקסטראַקשאַן ריידזשאַנץ אַלע אַנטהאַלטן קאַמפּאָונאַנץ וואָס ראַפּאַדלי ינכיבאַט רנאַסע.לייג צו די ליסאַט צו די געבילדעטער סעלז, און פשוט מישן עס, אַלע די סעלז קענען זיין ונ דורך געמישט מיט די ליסאַט, און די סעלז זענען גאָר ליסעד.נאָך די סעלז זענען ליסעד, די אַקטיוו ינגרידיאַנץ אין די ליסאַטע מיד ינכיבאַט די ינטראַסעללולאַר רנאַסע, אַזוי די רנאַ בלייבט בעשאָלעם.דאָס הײסט, װײַל די קולטורעלע צעלן װערן לײכט און גאָר פֿאַרבונדן מיט דעם ליסאַט, װערט זײער רנאַ נישט לײכט דערנידעריקט;אויף די אנדערע האַנט, די רנאַ אין די געוועב איז לייכט דיגריידיד ווייַל די סעלז אין די געוועב זענען נישט גרינג צו געשווינד קאָנטאַקט די ליסאַטע.רעכט צו גענוג קאָנטאַקט.אזוי,אַסומינג עס איז אַ וועג צו ווענדן די געוועב אין אַ איין צעל בשעת ינכיבאַטינג רנאַ טעטיקייט, די פּראָבלעם פון דערנידעריקונג קען זיין גאָר סאַלווד.
פליסיק ניטראָגען מילינג איז די מערסט עפעקטיוו אַזאַ אופֿן.אָבער, די פליסיק ניטראָגען מילינג אופֿן איז זייער טראַבאַלסאַם, ספּעציעל ווען די נומער פון סאַמפּאַלז איז גרויס.דא ם הא ט זי ך געבראכ ט דע ר װײטע ר בעסטע זאך : דע ם האמגענייזער .דיהאָמאָגעניזערדער אופֿן טוט נישט באַטראַכטן די קשיא פון ווי רנאַסע טעטיקייט איז ינכיבאַטיד איידער סעלז זענען קאָנטאַקטעד מיט די ליסאַטע, אָבער אלא מתפלל אַז די קורס פון געוועב דיסראַפּשאַן איז פאַסטער ווי די קורס אין וואָס ינטראַסעללולאַר רנאַסע דיגרייד רן.
די ווירקונג פון עלעקטריק האָמאָגעניזער איז בעסער,און די ווירקונג פון גלאז האָמאָגעניזער איז נעבעך, אָבער אין אַלגעמיין, די האָמאָגעניזער אופֿן קען נישט פאַרמייַדן די דערשיינונג דערשיינונג.דעריבער, אויב די יקסטראַקשאַן איז דיגריידיד, דער אָריגינעל עלעקטריק האָמאָגעניזער זאָל זיין געניצט פֿאַר גרינדינג מיט פליסיק ניטראָגען;דער אָריגינעל גלאז האָמאָגעניזער זאָל זיין פארענדערט צו אַן עלעקטריק האָמאָגעניזער אָדער גלייַך מילד מיט פליסיק ניטראָגען.די פּראָבלעם איז כּמעט 100% פיזאַבאַל.באַקומען ריזאַלווד.
די פּראָבלעם פון טומע רעזאַדו וואָס אַפעקץ סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ האט מער דייווערס סיבות ווי דערנידעריקונג, און די סאַלושאַנז זענען קאָראַספּאַנדינג אַנדערש.אין מסקנא,אויב עס איז דערנידעריקונג אָדער ריזידזשואַל ימפּיוראַטיז אין די געוועב, די יקסטראַקשאַן אופֿן / רייידזשאַנט פֿאַר די ספּעציפיש יקספּערמענאַל מאַטעריאַל מוזן זיין אָפּטימיזעד.איר טאָן ניט האָבן צו נוצן דיין טייַער סאַמפּאַלז פֿאַר אַפּטאַמאַזיישאַן: איר קענען קויפן עטלעכע קליין אַנימאַלס ווי פיש / הינדל פון די מאַרק, נעמען די קאָראַספּאַנדינג טייל פון די מאַטעריאַל פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן, און די אנדערע טייל פֿאַר פּראָטעין יקסטראַקשאַן - מאָל מיט מויל, מאָגן און געדערעם עקסטראַקט.
דער ציל רנאַ פון די יקסטראַקטיד רנאַ איז געניצט פֿאַר פאַרשידענע נאָכפאָלגן יקספּעראַמאַנץ, און די קוואַליטעט באדערפענישן זענען אַנדערש
קדנאַ ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן ריקווייערז רנאַ אָרנטלעכקייַט אָן רעזאַדוז פון ענזיים אָפּרוף ינכיבאַטערז;נאָרדערן ריקווייערז העכער רנאַ אָרנטלעכקייַט און נידעריקער רעקווירעמענץ פֿאַר רעזאַדוז פון ענזיים אָפּרוף ינכיבאַטערז;RT-PCR טוט נישט דאַרפן צו הויך רנאַ אָרנטלעכקייַט,אָבער ינכיבאַץ ענזיים ריאַקשאַנז.רעשט רעקווירעמענץ זענען שטרענג.דער אַרייַנשרייַב דיטערמאַנז די רעזולטאַט;יעדער מאָל דער ציל איז צו קריגן די העכסטן ריינקייַט רנאַ, עס וועט קאָסטן די מענטשן און געלט.
זאַמלונג / סטאָרידזש פון סאַמפּאַלז
סיבות וואָס ווירקן דערנידעריקונג נאָך די מוסטער פאַרלאָזן די לעבעדיק גוף / אָדער דער אָריגינעל וווּקס סוויווע, די ענדאָגענאָוס ענזימעס אין די מוסטער וועט אָנהייבן צו דיגרייד רנאַ,און די דערנידעריקונג קורס איז שייך צו די אינהאַלט פון ענדאָגענאָוס ענזימעס און טעמפּעראַטור.טראַדיטיאָנאַללי, עס זענען בלויז צוויי וועגן צו גאָר ינכיבאַט ענדאָגענאָוס ענזיים טעטיקייט: לייגן ליסאַטע מיד און האָמאָגעניזירן ונ דורך און ראַפּאַדלי;שנייַדן אין קליין ברעקלעך און מיד פרירן אין פליסיק ניטראָגען.ביידע אַפּראָוטשיז דאַרפן שנעל אָפּעראַציע.די יענער איז פּאַסיק פֿאַר אַלע סאַמפּאַלז, בשעת די ערשטע איז בלויז פּאַסיק פֿאַר געוועבן מיט נידעריק אינהאַלט פון סעלז און ענדאָגענאָוס ענזימעס און גרינגער צו האָמאָגעניזירן.ספּאַסיפיקלי, פאַבריק געוועב, לעבער, טהימוס, פּאַנקרעאַס, מילץ, מאַרך, פעט, מוסקל געוועב, אאז"ו ו זענען בעסטער פאַרפרוירן מיט פליסיק ניטראָגען איידער פּראַסידינג.
פראַגמענטאַטיאָן און האָמאָגעניזאַטיאָן פון סאַמפּאַלז
סיבות אַפעקטינג דערנידעריקונג און טראָגן מוסטער פראַגמאַנטיישאַן איזפֿאַר גרונטיק כאָומאַדזשאַנאַזיישאַן, וואָס איז פֿאַר גאַנץ און גאַנץ מעלדונג פון רנאַ.סעלז קענען זיין גלייַך כאָומאַדזשאַנייזד אָן צעבראכן.געוועבן קענען זיין כאָומאַדזשאַנייזד בלויז נאָך זיי צעבראכן.הייוון און באַקטיריאַ דאַרפֿן צו זיין צעבראכן מיט קאָראַספּאַנדינג ענזימעס איידער זיי קענען זיין כאָומאַדזשאַנייזד.געוועבן מיט אַ נידעריקער ענדאָגענאָוס ענזיים אינהאַלט און גרינגער כאָומאַדזשאַנאַזיישאַן קענען זיין קראַשט און כאָומאַדזשאַנייזד אין איין מאָל אין די ליסאַטע דורך אַ האָמאָגעניזער;פאַבריק געוועב, לעבער, טהימוס, פּאַנקרעאַס, מילץ, מאַרך, פעט, מוסקל געוועב און אנדערע סאַמפּאַלז, זיי זענען אָדער הויך אין ענדאָגענאָוס ענזימעס אָדער זענען נישט לייכט כאָומאַדזשאַנייזד,אַזוי געוועב דיסראַפּשאַן און האָמאָגעניזאַטיאָן מוזן זיין דורכגעקאָכט סעפּעראַטלי.די מערסט פאַרלאָזלעך און מערסט פּראָדוקטיוו אופֿן פון פראַגמאַנטיישאַן איז מילינג מיט פליסיק ניטראָגען, און די מערסט פאַרלאָזלעך אופֿן פון האָמאָגעניזאַטיאָן איז די נוצן פון אַן עלעקטריש האָמאָגעניזער.א ספּעציעלע באַמערקונג וועגן מילינג מיט פליסיק ניטראָגען: די מוסטער זאָל ניט זיין טאָד בעשאַס די גאנצע מילינג פּראָצעס, ווייַל ענדאָגענאָוס ענזימעס זענען מער מסתּמא צו פונקציאָנירן ווען פאַרפרוירן.
ברירה פון ליסאַטע
אַפעקטינג די קאַנוויניאַנס פון אָפּעראַציע און די סיבות פון ריזידזשואַל ענדאָגענאָוס ימפּיוראַטיז די קאַמאַנלי געוויינט ליסיס סאַלושאַנז קענען כּמעט ינכיבאַט די טעטיקייט פון רנאַסע.דעריבער, דער שליסל פונט פון טשוזינג אַ לייסיס לייזונג איז צו באַטראַכטן אין קאָמבינאַציע מיט די רייניקונג אופֿן.עס איז איין ויסנעם:סאַמפּאַלז מיט אַ הויך ענדאָגענאָוס ענזיים אינהאַלט זענען רעקאַמענדיד צו נוצן אַ ליסאַטע מיט פענאָל צו פאַרגרעסערן די פיייקייט צו ינאַקטיווייט ענדאָגענאָוס ענזימעס.
ברירה פון רייניקונג אופֿן
סיבות וואָס ווירקן ריזידזשואַל ענדאָגענאָוס ימפּיוראַטיז, יקסטראַקשאַן גיכקייַט פֿאַר ריין סאַמפּאַלז אַזאַ ווי סעלז, באַפרידיקנדיק רעזולטאַטן קענען זיין באקומען מיט כּמעט קיין רייניקונג אופֿן.אָבער פֿאַר פילע אנדערע סאַמפּאַלז, ספּעציעל יענע מיט הויך לעוועלס פון ימפּיוראַטיז אַזאַ ווי געוויקסן, לעבער, באַקטיריאַ, אאז"ו ו, טשוזינג אַ פּאַסיק רייניקונג אופֿן איז קריטיש.די זייַל סענטריפוגאַל רייניקונג אופֿן האט אַ שנעל יקסטראַקשאַן גיכקייַט און קענען יפעקטיוולי באַזייַטיקן ימפּיוראַטיז וואָס ווירקן די סאַבסאַקוואַנט ענזימאַטיק אָפּרוף פון רנאַ, אָבער עס איז טייַער (פאָרעגענע קענען פאָרשלאָגן פּרייַז-עפעקטיוו קיץ, מער דעטאַילס גיטדאָ);ניצן שפּאָרעוודיק און קלאַסיש רייניקונג מעטהאָדס, אַזאַ ווי ליקל אָפּזאַץ, קענען אויך באַקומען באַפרידיקנדיק רעזולטאַטן, אָבער די אָפּעראַציע צייט איז לאַנג..
"דריי דיסציפּלין און אַכט אַטענשאַנז" פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן
דיסציפּלין 1:שטעלן אַ סוף צו די קאַנטאַמאַניישאַן פון עקסאָגענאָוס ענזימעס.
באַמערקונג 1:שטרענג טראָגן מאַסקס און גלאַווז.
באַמערקונג 2:די סענטריפודזש טובז, שפּיץ קעפ, פּייפּעט ראַדז, עלעקטראָפאָרעסיס טאַנגקס און יקספּערמענאַל בענטשעס ינוואַלווד אין דער עקספּערימענט זאָל זיין ונ דורך דיספּאָוזד.
באַמערקונג 3:די רייידזשאַנץ / סאַלושאַנז ינוואַלווד אין דער עקספּערימענט, ספּעציעל וואַסער, מוזן זיין רנאַסע-פֿרייַ.
דיסציפּלין 2:פאַרשפּאַרן די טעטיקייט פון ענדאָגענאָוס ענזימעס
באַמערקונג 4:קלייַבן אַ צונעמען כאָומאַדזשאַניזיישאַן אופֿן.
באַמערקונג 5:קלייַבן אַ צונעמען ליסאַטע.
באַמערקונג 6:קאָנטראָל די סטאַרטינג סומע פון די מוסטער.
דיסציפּלין 3:דערקלערן דיין עקסטראַקטיאָן ציל
באַמערקונג 7:מיט קיין ליסאַטע סיסטעם אַפּראָוטשינג די מאַקסימום סטאַרטינג סומע פון מוסטער, די יקסטראַקשאַן הצלחה קורס טראפנס שארף.
באַמערקונג 8:דער בלויז עקאָנאָמיש קריטעריאָן פֿאַר מצליח רנאַ יקסטראַקשאַן איז אַ הצלחה אין סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ, נישט טראָגן.
Top 10 קוואלן פון רנאַסע קאַנטאַמאַניישאַן
1. פינגער זענען דער ערשטער מקור פון עקסאָגענאָוס ענזימעס, אַזוי גלאַווז מוזן זיין וואָרן און ריפּלייסט אָפט.אין דערצו, מאַסקס מוזן אויך זיין וואָרן, ווייַל ברידינג איז אויך אַ וויכטיק מקור פון ענזימעס.אַן נאָך נוץ פון טראָגן אַ הענטשקע מאַסקע איז צו באַשיצן די עקספּערימענט.
2. פּיפּעטטע עצות, סענטריפודזש טובז, פּיפּעטטעס - רנאַסע קענען ניט זיין ינאַקטיווייטיד דורך סטעראַליזיישאַן אַליין, אַזוי פּייפּעט עצות און סענטריפודזש טובז זאָל זיין באהאנדלט מיט דעפּק, אפילו אויב זיי זענען אנגעצייכנט ווי דעפּק באהאנדלט.עס איז בעסטער צו נוצן אַ ספּעציעל-ציל פּיפּעטטע, ווישן עס מיט אַ 75% אַלקאָהאָל וואַטע פּילקע איידער נוצן, ספּעציעל די רוט;אין דערצו, זיין זיכער נישט צו נוצן אַ קאָפּ רימוווער.
3. די וואַסער / באַפער מוזן זיין פריי פון רנאַסע קאַנטאַמאַניישאַן.
4. אין מינדסטער די פּרובירן טיש זאָל זיין ווישן ריין מיט 75% אַלקאָהאָל וואַטע באַללס.
5.ענדאָגענאָוס רנאַסע אַלע געוועבן אַנטהאַלטן ענדאָגענאָוס ענזימעס, אַזוי שנעל ייַז קאַלט פון געוועבן מיט פליסיק ניטראָגען איז דער בעסטער וועג צו רעדוצירן דערנידעריקונג.די פליסיק ניטראָגען סטאָרידזש / גרינדינג אופֿן איז טאַקע ומבאַקוועם, אָבער עס איז דער בלויז וועג פֿאַר געוועבן מיט הויך לעוועלס פון ענדאָגענאָוס ענזימעס.
6. רנאַ סאַמפּאַלז רנאַ יקסטראַקשאַן פּראָדוקטן קען אַנטהאַלטן טראַסעס פון רנאַסע קאַנטאַמאַניישאַן.
7. פּלאַסמיד יקסטראַקשאַן פּלאַסמיד יקסטראַקשאַן אָפט ניצט רנאַסע צו דיגרייד רנאַ, און די ריזידזשואַל רנאַסע זאָל זיין דיידזשעסטיד מיט פּראָטעינס ק און יקסטראַקטיד דורך פּסי.
8. רנאַ סטאָרידזש אפילו אויב עס איז סטאָרד אין נידעריק טעמפּעראַטור, שפּור אַמאַונץ פון רנאַסע וועט פאַרשאַפן רנאַ דערנידעריקונג.דער בעסטער לייזונג פֿאַר לאַנג-טערמין פּרעזערוויישאַן פון רנאַ איז אַ סאַספּענשאַן פון זאַלץ / אַלקאָהאָל, ווייַל אַלקאָהאָל ינכיבאַץ אַלע ענזימאַטיק טעטיקייט ביי נידעריק טעמפּעראַטורעס.
9. ווען קאַטיאָנס (Ca, Mg) אַנטהאַלטן די ייאַנז, באַהיצונג ביי 80C פֿאַר 5 מינוט וועט פאַרשאַפן רנאַ צו זיין קלעאַוועד, אַזוי אויב רנאַ דאַרף זיין העאַטעד, די פּרעזערוויישאַן לייזונג דאַרף אַנטהאַלטן אַ טשעלאַטינג אַגענט (1 מם סאָדיום סיטראַטע, pH 6.4).
10. ענזימעס געניצט אין סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ קען זיין קאַנטאַמאַנייטאַד דורך רנאַסע.
10 עצות פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן
1: געשווינד פאַרמייַדן רנאַסע טעטיקייט.סאַמפּאַלז זענען געשווינד פאַרפרוירן נאָך זאַמלונג, און רנאַסע איז ינאַקטיווייטיד דורך גיך אָפּעראַציע בעשאַס ליסיס.
2: קלייַבן אַ צונעמען יקסטראַקשאַן אופֿן פֿאַר געוועב מיט הויך ריבאָזימע אינהאַלט, און אַדאַפּאָוס געוועב איז בעסטער צו נוצן דעם אופֿן מיט פענאָל.
3: פּראָגנאָז קוואַליטעט ריקווייערז נאָרדערן, קדנאַ ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן ריקווייערז הויך אָרנטלעכקייַט, און RT-PCR און RPA (Ribonuclease Protection Assay) טאָן ניט דאַרפן הויך אָרנטלעכקייַט.RT-PCR ריקווייערז הויך ריינקייַט (רעזאַדוז פון ענזיים ינכיבאַטער).
4: גרונטיק האָמאָגעניזאַטיאָן איז דער שליסל צו פֿאַרבעסערן טראָגן און רידוסינג דערנידעריקונג.
5: קוק די אָרנטלעכקייַט פון רנאַ עלעקטראָפאָרעסיס דיטעקשאַן, 28S: 18S = 2: 1 איז אַ גאַנץ צייכן, 1: 1 איז אויך פּאַסיק פֿאַר רובֿ יקספּעראַמאַנץ.
6: באַזייַטיקונג פון דנאַ פֿאַר RT-PCR, מענגע אַנאַליסיס עס איז בעסטער צו נוצן דנאַסע איך צו באַזייַטיקן דנאַ.
7: רעדוצירן די קאַנטאַמאַניישאַן פון עקסאָגענאָוס ענזימעס - ענזימעס קענען ניט זיין ימפּאָרטיד פֿון די אַרויס.
8: ווען קאַנסאַנטריישאַן פון נידעריק-קאַנסאַנטריישאַן נוקלעיק זויער, אַ קאָ-אָפּזאַץ רייידזשאַנט זאָל זיין צוגעגעבן.אבער צו פאַרמייַדן די קאָ-פּרעסיפּיטאַנט מיט ענזימעס און דנאַ קאַנטאַמאַניישאַן.
9: ונ דורך צעלאָזן די רנאַ, אויב נייטיק, היץ ביי 65C פֿאַר 5 מינוט.
פּאַסיק סטאָרידזש אופֿן
עס קענען זיין סטאָרד ביי -20C פֿאַר אַ קורץ צייט, און ביי -80C פֿאַר אַ לאַנג צייַט.דער ערשטער שריט אין ימפּרוווינג רנאַ ייעלדס איז צו פאַרשטיין אַז די רנאַ אינהאַלט פון פאַרשידענע סאַמפּאַלז וועריז זייער.הויך זעט (2-4וג / מג) אַזאַ ווי לעבער, פּאַנקרעאַס, האַרץ, מיטל זעט (0.05-2וג / מג) אַזאַ ווי מאַרך, עמבריאָ, ניר, לונג, טימוס, אָוווערי, נידעריק זעט (<0.05וג / מג) מג) אַזאַ ווי פּענכער, ביין, פעט.
1: ליס סעלז צו באַפרייַען RN - אויב רנאַ איז נישט באפרייט, די טראָגן וועט זיין רידוסט.עלעקטריק האָמאָגעניזאַטיאָן אַרבעט בעסער ווי אנדערע האָמאָגעניזאַטיאָן מעטהאָדס, אָבער קען אויך דאַרפֿן צו זיין קאַמביינד מיט אנדערע מעטהאָדס, אַזאַ ווי פליסיק ניטראָגען מאַשינג, ענזימאַטיק דיידזשעסטשאַן (ליסאָזימע / ליטיקאַסע)
2: אָפּטימיזאַטיאָן פון די יקסטראַקשאַן אופֿן.די ביגאַסט פּראָבלעמס מיט פענאָל-באזירט מעטהאָדס זענען דערענדיקט סטראַטיפיקאַטיאָן און פּאַרטיייש רנאַ אָנווער (די סופּערנאַטאַנט קענען ניט זיין גאָר אַוועקגענומען).דערענדיקט סטראַטיפיקאַטיאָן איז רעכט צו דער הויך נוקלעיק זויער און פּראָטעין אינהאַלט, וואָס קענען זיין סאַלווד דורך ינקריסינג די קאַנסאַנטריישאַן פון ליסאַטע אָדער רידוסינג די סומע פון פּראָטעין.א שריט פון טשלאָראָפאָרם יקסטראַקשאַן איז צוגעגעבן צו די אַדאַפּאָוס געוועב.רנאַ אָנווער קענען זיין רידוסט דורך צוריק-פּאַמפּינג אָדער דורך רימוווינג די אָרגאַניק שיכטע נאכגעגאנגען דורך סענטריפוגיישאַן.די ביגאַסט פּראָבלעם מיט זייַל סענטריפוגאַטיאָן-באזירט מעטהאָדס איז וידעפדיק מוסטער.
קלאַסיש עקסטראַקטיאָן עצות
1. פענאָל רייניקונג: לייג אַ גלייַך באַנד פון 1: 1 פענאָל / טשלאָראָפאָרם און מישן וויגעראַסלי פֿאַר 1-2 מינוט.סענטריפיודזש בייַ הויך גיכקייַט פֿאַר 2 מינוט.קערפאַלי באַזייַטיקן די סופּערנאַטאַנט (80-90%).קיינמאָל באַקומען צו די מיטל שיכטע.אַ גלייַך באַנד פון דער אָפּרוף לייזונג קענען זיין מוסיף צו פענאָל / טשלאָראָפאָרם און די סופּערנאַטאַנט איז אַוועקגענומען.די צוויי סופּערנאַטאַנץ קענען זיין געמישט צוזאַמען פֿאַר נוקלעיק זויער אָפּזאַץ צו פֿאַרבעסערן די טראָגן.דו זאלסט נישט זיין צו מילד ווען מיקסינג, און טאָן ניט פּרובירן צו באַזייַטיקן אַלע די סופּערנאַטאַנט.
2. וואַשינג מיט 70-80% עטאַנאָל: בעשאַס וואַשינג, די נוקלעיק זויער מוזן זיין סוספּענדעד צו ענשור אַז די ריזידזשואַל זאַלץ איז געוואשן אַוועק.אין דער זעלביקער צייַט, מיד נאָך גיסן אַוועק די עטאַנאָל, סענטריפודזש מיט הויך גיכקייַט פֿאַר אַ ביסל סעקונדעס, און דעמאָלט באַזייַטיקן די ריזידזשואַל עטאַנאָל מיט אַ פּיפּעטטע.צעלאָזן נאָך שטייענדיק אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר 5-10 מינוט.
11. עקסטראַקטיאָן פון ספּעציעלע אָרגאַניזאַציעס
1. פייבראַס געוועב: דער שליסל צו רנאַ יקסטראַקשאַן פון פייבראַס געוועב אַזאַ ווי האַרץ / סקעלעטאַל מוסקל איז צו גאָר צעשטערן די געוועב.די געוועבן האָבן נידעריק צעל געדיכטקייַט, אַזוי די סומע פון רנאַ פּער אַפּאַראַט וואָג פון געוועב איז נידעריק, און עס איז בעסטער צו נוצן ווי פיל סטאַרטינג סומע ווי מעגלעך.זייט זיכער צו מאָל די געוועב ונ דורך אונטער ייַז קאַלט טנאָים.
2. געוועבן מיט הויך פּראָטעין / פעט צופרידן: מאַרך / גרינס פעט צופרידן איז הויך.נאָך פּסי יקסטראַקשאַן, די סופּערנאַטאַנט כּולל ווייַס פלאָקקולעס.די סופּערנאַטאַנט מוזן זיין שייַעך-יקסטראַקטיד מיט טשלאָראָפאָרם.
3. געוועבן מיט הויך נוקלעיק זויער / ריבאָזימע צופרידן: די מילץ / טהימוס האט הויך נוקלעיק זויער און ריבאָזימע צופרידן.גרינדינג געוועב אונטער ייַז קאַלט טנאָים נאכגעגאנגען דורך גיך האָמאָגעניזאַטיאָן קענען יפעקטיוולי ינאַקטיווייט ריבאָזימעס.אָבער, אויב די ליסאַטע איז אויך וויסקאַס (רעכט צו הויך נוקלעיק זויער צופרידן), די PCI יקסטראַקשאַן וועט נישט קענען צו סטראַטיפייינג יפעקטיוולי;אַדינג מער ליסאַטע קענען סאָלווע דעם אַרויסגעבן.קייפל פּסי יקסטראַקשאַנז קענען באַזייַטיקן מער ריזידזשואַל דנאַ.אויב אַ ווייַס אָפּזאַץ פארמען מיד נאָך אַדינג אַלקאָהאָל, עס ינדיקייץ דנאַ קאַנטאַמאַניישאַן.שייַעך-יקסטראַקטיאָן מיט אַסידיק פּסי נאָך דיסאַלושאַן קענען באַזייַטיקן דנאַ קאַנטאַמאַניישאַן.
4. פּלאַנט געוועב: פּלאַנט געוועב איז מער קאָמפּליצירט ווי כייַע געוועב.אין אַלגעמיין, געוויקסן זענען ערד אונטער פליסיק ניטראָגען טנאָים, אַזוי רנאַ דערנידעריקונג דורך ענדאָגענאָוס ענזימעס איז ומגעוויינטלעך.אויב די דערנידעריקונג פּראָבלעם איז נישט ריזאַלווד, עס איז כּמעט זיכער געפֿירט דורך ימפּיוראַטיז קאַנטיינד אין די מוסטער.די ימפּיוראַטיז קאַנטיינד אין פילע געוויקסן וועט פירן צו רעזאַדוז, און די סיבה פֿאַר רעזאַדוז איז אָפט ווייַל די ימפּיוראַטיז האָבן עטלעכע סימאַלעראַטיז מיט רנאַ: איר אָפּזאַץ און איך אָפּזאַץ, און איר אַדסאָרב און איך אַבזאָרבז.די קעראַקטעריסטיקס באַשטימען אַז זיי זענען זייער שטאַרק ענזיים ינכיבאַטערז.
דערווייַל, געשעפט רנאַ יקסטראַקשאַן רייידזשאַנץ קענען זיין צוגעפאסט צו כּמעט אַלע כייַע געוועבן מיט קליין אַדזשאַסטמאַנץ, אָבער עס זענען ווייניק געשעפט רנאַ יקסטראַקשאַן רייידזשאַנץ וואָס קענען זיין פּאַסיק פֿאַר רובֿ פאַבריק געוועבן.צומ גליק, Foregene קענען צושטעלן ספּעציעלעפאַבריק רנאַ יקסטראַקשאַן קיץ, מיר האבןפּלאַנט גאַנץ רנאַ אפגעזונדערטקייט קיט, פּלאַנט גאַנץ רנאַ יסאָלאַטיאָן קיט פּלוס.די יענער איז ספּעציעל דיזיינד פֿאַר געוויקסן מיט הויך פּאָליסאַקשאַרידע און פּאָליפענאָל אינהאַלט.פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן, באַמערקונגען פון לאַב ניצערס איז דער הויפּט גוט.
12. די ווירקונג פון פרירן און טאָינג מוסטער די פאַרפרוירן מוסטער קען זיין גרעסערע, און עס דאַרף זיין שנייַדן איידער עס איז געניצט פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן.סאַמפּאַלז טענד צו צעשמעלצן (עפשער טייל) בעשאַס קאַטינג.פאַרפרוירן סאַמפּאַלז קען זיין ווייד איידער רנאַ יקסטראַקשאַן, און טאָינג וועט באשטימט פּאַסירן בעשאַס דעם פּראָצעס.מאל, די טאָינג פון די מוסטער אויך אַקערז בעשאַס די פליסיק ניטראָגען מילינג פּראָצעס;אָדער די פאַרפרוירן מוסטער איז גלייַך מוסיף צו די ליסאַטע אָן פליסיק ניטראָגען מילינג, און טאָינג וועט באשטימט פּאַסירן איידער די גאַנץ כאָומאַדזשאַנאַזיישאַן.יקספּעראַמאַנץ האָבן געוויזן אַז פאַרפרוירן געוועב איז מער פּראָנע צו רנאַ דערנידעריקונג בעשאַס טאָינג ווי פריש געוועב.די מסתּמא סיבה: דער פרירן-טאָ פּראָצעס דיסראַפּץ סטראַקטשערז ין דער צעל, מאכן עס גרינגער פֿאַר ענדאָגענאָוס ענזימעס צו קומען אין דירעקט קאָנטאַקט מיט די רנאַ.
13. משפט פון רנאַ קוואַליטעט יוזשאַוואַלי, עלעקטראָפאָרעסיס איז געניצט צו ריכטער די אָרנטלעכקייַט פון רנאַ, און אַ260/אַ280 איז געניצט צו ריכטער די ריינקייַט פון רנאַ.אין טעאָריע, בעשאָלעם רנאַ האט אַ פאַרהעלטעניש פון 28S:18S = 2.7:1, און רובֿ דאַטן ונטערשטרייַכן די פאַרהעלטעניש פון 28S:18S = 2:1.דער פאַקט איז אַז כּמעט קיין פון די רנאַ יקסטראַקטיד פון סאַמפּאַלז אנדערע ווי סעלז איז אין אַ 2: 1 פאַרהעלטעניש (דאָס איז באקומען מיט די אַגילענט ביאָאַנאַליזער).
די עלעקטראָפאָרעסיס רעזולטאטן פון רנאַ זענען אַפעקטאַד דורך פילע סיבות, אַרייַנגערעכנט צווייטיק סטרוקטור, עלעקטראָפאָרעסיס טנאָים, מוסטער מאַסע, גראַד פון זעטיקונג דורך עב, אאז"ו ו. ניצן געבוירן עלעקטראָפאָרעסיס צו דעטעקט רנאַ און נוצן דנאַ מאַרקער ווי אַ קאָנטראָל.אויב די 28S ביי 2kb און די 18S ביי 0.9kb זענען קלאָר, און 28S: 18S> 1, די אָרנטלעכקייַט קענען טרעפן די באדערפענישן פון רובֿ סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ.
A260 / A280 איז אַ גראדן וואָס האָט געפֿירט אַ פּלאַץ פון צעמישונג.ערשטער פון אַלע, עס איז נייטיק צו דערקלערן די אָריגינעל טייַטש פון דעם גראדן פֿאַר נוקלעיק אַסאַדז: ריין רנאַ, זייַן אַ260/280 = וועגן 2.0.ריין רנאַ איז די 'גרונט' און A260/A280 = 2 איז די 'ווירקונג'.איצט אַלעמען איז ניצן A260/A280 ווי אַ 'גרונט', טראכטן אַז "אויב A260/A280 = 2, רנאַ איז ריין", וואָס געוויינטלעך פירט צו צעמישונג.
אויב איר זענט אינטערעסירט, איר קענען לייגן אַ ביסל רייידזשאַנט וואָס איז אָפט געניצט אין יקסטראַקשאַן, אַזאַ ווי פענאָל, גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע, PEG, אאז"ו ו, צו דיין רנאַ מוסטער, און מעסטן די A260/A280 פאַרהעלטעניש.דער פאַקט איז אַז פילע פון די רייידזשאַנץ געניצט פֿאַר רנאַ יקסטראַקשאַן, ווי געזונט ווי פילע ימפּיוראַטיז אין די מוסטער, אַרייַנציען אַרום A260 און A280, וואָס ווירקן A260/A280.
די מערסט ינסטראַקטיוו צוגאַנג איצט איז צו יבערקוקן רנאַ סאַמפּאַלז אין די קייט פון 200-300 נם.די ויסבייג פון ריין רנאַ האט די פאלגענדע קעראַקטעריסטיקס: די ויסבייג איז גלאַט, A230 און A260 זענען צוויי ינפלעקשאַן פונקטן, A300 איז נאָענט צו 0, A260/A280 = אַרום 2.0, און A260/A230 = אַרום 2.0.אויב יבערקוקן דאַטן זענען נישט בנימצא, די A260/A230 פאַרהעלטעניש מוזן אויך זיין באשלאסן, ווייַל די פאַרהעלטעניש איז מער שפּירעוודיק צו אַריבערפירן פון אַלע ימפּיוראַטיז וואָס ווירקן די ענזימאַטיק אָפּרוף.נעמען אין חשבון די לינעאַר קייט פון די מיטל (0.1-0.5 פֿאַר A260).
עס זענען צוויי אנדערע נוציק דערשיינונגען: די פאַרהעלטעניש וועט זיין וועגן 0.3 נידעריקער ווען A260/A280 איז געמאסטן אין וואַסער;בשעת די פאַרהעלטעניש געמאסטן אין 10 מם עדטאַ איז וועגן 0.2 העכער ווי אַז געמאסטן אין 1 מם עדטאַ.
פֿאַרבונדענע פּראָדוקטן:
טשיינאַ פּלאַנט גאַנץ רנאַ אפגעזונדערטקייט קיט פאַבריקאַנט און סאַפּלייער |Foregene (foreivd.com)
רנאַ אפגעזונדערטקייט סעריע - Foregene Co., Ltd. (foreivd.com)
פּאָסטן צייט: יולי 15-2022
