ווי פיל איר וויסן

וועגן נעקסטראַקטיאָן פון וקלעיק זויער

דער אָנהייב און סוף פון פּיוראַפייד נוקלעיק זויער

אַלץ איז שווער אין די אָנהייב, פּיוראַפייד נוקלעיק זויער איז די מערסט

האַסכאָלע פון ​​מאָלעקולאַר יקספּעראַמאַנץ, פֿאַר סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ

הצלחה אָדער דורכפאַל האט אַ קריטיש פּראַל.

שפּור / הינטער-שפּור UV ספּעקטראָפאָטאָמעטער איז פייווערד דורך פילע וויסנשאפטלעכע ריסערטשערז ווייַל עס קענען דיטעקט נוקלעיק זויער קאַנסאַנטריישאַן און פּראָטעין און זאַלץ יאָן רעזאַדוז פשוט, געשווינד און עקאָנאָמיקאַללי.

ווי מיר אַלע וויסן, A260 מיטל נוקלעיק זויער אַבזאָרבאַנס אָד ווערט, A280 מיטל פּראָטעין קאַנסאַנטריישאַן אַבזאָרבאַנס אָד ווערט, A230 מיטל זאַלץ יאָן קאַנסאַנטריישאַן אַבזאָרבאַנס אָד ווערט, אַזוי A260 קענען בייַטן נוקלעיק זויער קאַנסאַנטריישאַן, A260/280 מיטל פּראָטעין רעזאַדו, A260/230 מיטל זאַלץ יאָן רעזאַדו, אָבער דאָס איז בלויז אַ רעזולטאטן באזירט אויף אַ רעזולטאט פון ריסערטשערז.קאַנווענשאַנאַל"צו גלויבן אַז עס קענען דערקלערן די ריינקייַט פון דנאַ און רנאַ צואַ געוויסער מאָס.עס איז נישט דער בלויז נאָרמאַל פֿאַר די לעגיטימאַציע פון ​​נוקלעיק זויער טראָגן און ריינקייַט, עס איז בלויז געניצט ווי אַ רעפֿערענץ, און עס איז נישט אַ "גאָלד נאָרמאַל".

די Thermo Fisher ND-2000 מאַנואַל עמפאַסייזיז די רילייאַבילאַטי פון די פּרובירן רעזולטאַטן

די סיבה איז אַז די רעזולטאַטן באקומען דורך ניצן אַ מיקראָ / ולטראַמיקראָ ווו ספּעקטראָפאָטאָמעטער בלויז פאַרטראַכטנ די טראָגן און ריינקייַט פון נוקלעיק זויער פון די זייַט, און עס זענען פילע ינפלואַנסינג סיבות (אָפּטיש וועג, מוסטער באַנד, מוסטער קאַנסאַנטריישאַן, ף ווערט, אנדערע ייאַנז וואָס ווירקן אַבזאָרבאַנס מעזשערמאַנט, אאז"ו ו), די געמאסטן אָד ווערט איז נישט דאַווקע פּינטלעך.אין דער זעלביקער צייט, רעכט צו דער פעלן פון ספּעסיפיקאַטי פון די אַבזאָרבאַנס ווערט באַשטימונג מאַטעריאַל, איין-סטראַנדיד דנאַ, טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ, רנאַ, דנטפּס און עטלעכע פּראָטעינס אַלע האָבן אַבזאָרפּשאַן פּיקס ביי 260nm ווייוולענגט, און די קאַנסאַנטריישאַן באשלאסן דורך A260 אַליין איז נישט דאַווקע די פאַקטיש דנאַ אָדער רנאַ.קאַנסאַנטריישאַן, און זייַן אָרנטלעכקייַט און דערנידעריקונג קענען ניט זיין געמשפט.

אַזוי ווי צו ריכטער די קוואַליטעט פון אונדזער פּיוראַפייד נוקלעיק זויער?אין אַדישאַן צו נוצן אַ מיקראָ / ולטראַמיקראָ ווו ספּעקטראָפאָטאָמעטער פֿאַר דיטעקשאַן, מעטהאָדס אַזאַ ווי אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס זענען אויך פארלאנגט צו וויזשוואַלי ווייַזן די ריינקייַט און אָרנטלעכקייַט פון די נוקלעיק זויער און צו אָנווייַזן די קאַנסאַנטריישאַן אין אַ זיכער מאָס.אין דעם וועג, די נוקלעיק זויער טראָגן און ריינקייַט באקומען פון די דיטעקשאַן רעזולטאַטן פון פאַרשידן מעטהאָדס זענען קרעדאַבאַל.

עקספּערימענטאַל טשאַרט פאַרגלייַך

גענאָמיק דנאַ פון H1299 סעלז איז יקסטראַקטיד מיט פירמע א ס דנאַ עקסטראַקטיאָן קיץ, און באַטייטיק קאַנטאַמאַניישאַן פון טומע איז געזען, ריזאַלטינג אין הויך אָד וואַלועס

(OD מעזשערמאַנט ווערט און קאָראַספּאַנדינג עלעקטראָפעראָגראַם)

אפשאצונג אינדעקס

איז עס אַ "גאָלד נאָרמאַל" פֿאַר נוקלעיק זויער טראָגן און קוואַליטעט טעסטינג?

ווי ווייַט ווי מיר וויסן, עס איז קיין פּשוט, שנעל און ביליק אופֿן.צי עס איז ספּעקטראָפאָטאָמעטער, געל עלעקטראָפאָרעסיס אָדער מאַסע ספּעקטראָמעטרי, זיי אַלע פאַרטראַכטנ זיך די קאַנסאַנטריישאַן און ריינקייַט פון נוקלעיק זויער אין די לייזונג פון פאַרשידענע אַספּעקץ, און זיי דאַרפֿן צו זיין געמשפט דורך ריפערינג צו יעדער אנדערער.

דער בעסטער אפשאצונג אינדעקס איז שטענדיקדי נאָכגיין-אַרויף יקספּערמענאַל אַפּלאַקיישאַן.עס טוט נישט ווירקן די עפעקטיווקייַט פון פאַרקערט טראַנסקריפּציע און פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן.קריגן פאַרלאָזלעך אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקטן און Ct וואַלועס, און באַקומען אַ גאַנץ סיקוואַנס דורך סיקוואַנסינג איז אַ מצליח נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן.

צו סאַכאַקל, די מיינונג פון פאַרהעלטעניש-בלויז טעאָריע זאָל זיין טשאַלאַדזשד דורך די מיינונג פון "ניצן גוט דאַונסטרים יקספּערמענאַל רעזולטאַטן ווי גוט יקסטראַקשאַן פּאַראַמעטערס"!

רעקאַמענדיד פאָרעגענע דנאַ רנאַ יקסטראַקשאַן קיץ צו באַקומען הויך דנאַ / רנאַ ריינקייַט:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/