איך גלויבן אַז אַלעמען וועט שטענדיק טרעפן אַזאַ אָדער אַזאַ פּראָבלעמס ווען טאן פּקר ריאַקשאַנז, אָבער רובֿ פון זיי קענען זיין קלאַסאַפייד אין צוויי הויפּט פראבלעמען:

צו קליין אַמפּלאַפאַקיישאַן פון די דזשין מוסטער (אַמפּלאַפאַקיישאַן);
צו פיל ניט-ציל דזשין אַמפּלאַפאַקיישאַן.
ניצן אַדאַטיווז איז איינער פון די פּראָסט סטראַטעגיעס צו סאָלווע די פּראָבלעמס.יוזשאַוואַלי די ראָלע פון ​​אַדאַטיווז האט צוויי אַספּעקץ:
צווייטיק סטרוקטורפון גענעס (צווייטיק סטרוקטור);
רעדוצירן ניט-ספּעציפיש פּריימינג.
הייַנט, דער רעדאַקטאָר וועט בעקיצער באַקענען איר די פּראָסט אַדאַטיווז אין PCR ריאַקשאַנז און זייער פאַנגקשאַנז.
אַדאַטיווז וואָס רעדוצירן צווייטיק סטרוקטור
סולפאָקסידע(DMSO)
דזשין סאַמפּאַלזמיט הויך גק אינהאַלט.אָבער, DMSO אויך שטארק ראַדוסאַז Taq פּאָלימעראַסע טעטיקייט.דעריבער, אַלעמען האט צו באַלאַנסירן די מוסטער אַקסעסאַביליטי און די טעטיקייט פון די פּאָלימעראַסע.דער רעדאַקטאָר סאַגדזשעסץ אַז איר קענען פּרובירן פאַרשידענע קאַנסאַנטריישאַנז פון DSMO, אַזאַ ווי 2% צו 10%, צו געפֿינען די קאַנסאַנטריישאַן וואָס איז פּאַסיק פֿאַר דיין עקספּערימענט.
ניט-יאָניק דיטערדזשאַנץ
ניט-יאָניק דיטערדזשאַנץ, אַזאַ ווי 0.1-1% טריטאָן X-100, טוועען 20 אָדער נפּ-40, יוזשאַוואַלי רעדוצירן די צווייטיק סטרוקטור פון דנאַ.כאָטש דאָס קען פאַרגרעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן פון די מוסטער דזשין, דאָס וועט אויך פאַרשאַפן די קאָנפליקט פון ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן.אַזוי, די אַדאַטיווז אַרבעט געזונט פֿאַר נידעריק-טראָגן פּקר ריאַקשאַנז אָן דעבריס, אָבער נישט אַזוי גוט פֿאַר לעפיערעך ומריין פּרק ריאַקשאַנז.אן אנדער נוץ פון ניט-ייאַניק דיטערדזשאַנץ איז די רעדוקציע פון ​​SDS קאַנטאַמאַניישאַן.יוזשאַוואַלי בעשאַס די דנאַ יקסטראַקשאַן פּראָצעס, SDS וועט זיין געבראכט צו די פּקר שריט, וואָס זייער ינכיבאַץ די טעטיקייט פון די פּאָלימעראַסע.דעריבער, אַדינג 0.5% Tween-20 אָדער Tween-40 צו דער אָפּרוף קענען נוטראַלייז די נעגאַטיוו יפעקץ פון SDS.
בעטיין_
בעטאַינע קענען פֿאַרבעסערן דנאַ אַמפּלאַפאַקיישאַן דורך רידוסינג צווייטיק סטרוקטור פאָרמירונג און איז בכלל אַ "מיסטעריע" דערצו צו געשעפט פּקר קיץ.אויב איר ווילן צו נוצן בעטאַינע, איר זאָל שטעלן בעטאַינע אָדער בעטאַינע מאָנאָ-הידראַטע (בעטאַינע אָדער בעטאַינע מאָנאָ-כיידרייט), אָבער נישט בעטאַינע הידראָטשלאָרידע (בעטאַינע הקל), סטרויערן צו אַ לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 1-1.7 ם.בעטאַינע קענען אויך העלפֿן פֿאַרבעסערן ספּעסיפיקאַטי ווייַל עס ילימאַנייץ די אָפענגיקייַט פון די באַזע פּאָר זאַץ פון דנאַ מעלטינג / דנאַ דינאַטיישאַן.
אַדאַטיווז צו רעדוצירן ניט-ספּעציפיש פּריימינג
פאָרמאַמידע
פאָרמאַמידע איז אַ קאַמאַנלי געניצט אָרגאַניק פּקר אַדאַטיוו.עס קענען פאַרבינדן מיט הויפּט נאָרע און מינערווערטיק נאָרע אין דנאַ, דערמיט רידוסינג די פעסטקייַט פון די בעל דנאַ טאָפּל כיליקס און לאָוערינג די מעלטינג טעמפּעראַטור פון דנאַ.די קאַנסאַנטריישאַן פון פאָרמאַמידע געניצט אין פּקר יקספּעראַמאַנץ איז יוזשאַוואַלי 1% -5%.
טעטראַמעטהילאַמאָוניאַם קלאָרייד( TMAC)
טעטראַמעטהילאַממאָניום קלאָרייד קענען פאַרגרעסערן די ספּעסיפיקייט פון כייברידיזיישאַן (היברידיזאַטיאָן ספּעציפֿישקייט) און פאַרגרעסערן די מעלטינג טעמפּעראַטור פון דנאַ.אזוי, TMAC קענען באַזייַטיקן ניט-ספּעציפיש פּרימינג און רעדוצירן מיסביינדינג פון דנאַ און רנאַ.אויב איר נוצןדידזשענערייטיד אָנפאַנגעראין די פּקר אָפּרוף, געדענקט צו לייגן TMAC, וואָס איז קאַמאַנלי געניצט אין אַ קאַנסאַנטריישאַן פון 15-100מם.
אנדערע פּראָסט אַדאַטיווז
אין אַדישאַן צו די צוויי קאַטעגאָריעס פון אַדאַטיווז דערמאנט אויבן, עס זענען פילע פּראָסט אַדאַטיווז אין PCR ריאַקשאַנז, כאָטש זיי האָבן פאַרשידענע פאַנגקשאַנז, זיי זענען אויך זייער וויכטיק.
מאַגניזיאַם יאָן
מאַגנעסיום יאָן איז אַ ינדיספּענסאַבאַל קאָפאַקטאָר (קאָפאַקטאָר) פון פּאָלימעראַסע, דאָס איז, אָן מאַגניזיאַם יאָן, פּאָלימעראַסע איז ינאַקטיוו.אָבער, צו פיל מאַגניזיאַם ייאַנז קענען אויך ווירקן די עפעקטיווקייַט פון די פּאָלימעראַסע.די קאַנסאַנטריישאַן פון מאַגניזיאַם ייאַנז אין יעדער פּקר אָפּרוף וועט בייַטן.טשעלאַטינג אגענטן (אַזאַ ווי עדטאַ אָדער סיטראַטע), די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּס און פּראָטעינס אַלע ווירקן די קאַנסאַנטריישאַן פון מאַגניזיאַם ייאַנז.אַזוי, אויב איר האָבן פּראָבלעמס מיט דיין פּקר עקספּערימענט, איר קענען פּרובירן צו טוישן פאַרשידענע מאַגניזיאַם יאָן קאַנסאַנטריישאַנז, למשל, פון 1.0 צו 4.0 מם, מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5-1 מם צווישן.
עס איז כדאי צו באמערקן אַז קייפל פרירן-טאָ סייקאַלז קענען פירן צו קאַנסאַנטריישאַן סטראַטיפיקאַטיאָן פון מאַגניזיאַם קלאָרייד לייזונג.דעריבער, איר מוזן צעלאָזן עס גאָר איידער יעדער נוצן, און מישן עס געזונט איידער ניצן עס.
באָווין סערום אַלבומין(באָווין אַלבומין, BSA)
אין מאָלעקולאַר כעמיע יקספּעראַמאַנץ, באָווין סערום אַלבומין איז אַ זייער פּראָסט אַדאַטיוו, ספּעציעל אין ריסטריקשאַן ענזיים דיידזשעסטשאַן און פּקר יקספּעראַמאַנץ.אין פּקר ריאַקשאַנז, BSA איז נוציק אין רידוסינג קאַנטאַמאַנאַנץ אַזאַ ווי פענאָליק קאַמפּאַונדז.און עס איז אויך געזאגט אַז עס קענען רעדוצירן די אַדכיזשאַן פון רעאַקטאַנץ צו די וואַנט פון די פּרובירן רער.אין די פּקר אָפּרוף, יוזשאַוואַלי די קאַנסאַנטריישאַן פון BSA צוגעגעבן קענען דערגרייכן 0.8 מג / מל.
 
פֿאַרבונדענע פּראָדוקטן:
PCR Hero(מיט פאַרב)
PCR Hero