מחברים: וואַנג קסיאַויאַן, דזשאַו עריו

אַפּאַראַט: דזשיאַאָזשאָו האָספּיטאַל, דאָנגפאַנג האָספּיטאַל אַפיליייטאַד צו טאָנגדזשי אוניווערסיטעט

דערווייַל, דער הויפּט טיפּ פון מוסטער פֿאַר רעספּעראַטאָרי פּאַטאַדזשאַן נוקלעיק זויער דיטעקשאַן איז האַלדז ווישער.עס זענען פילע מינים פון קאַמאַנלי געניצט מוסטער פּרעזערוויישאַן סאַלושאַנז, וואָס אַלע דאַרפֿן צו זיין ריפרידזשערייטיד אָדער פאַרפרוירן פֿאַר טראַנספּערטיישאַן און סטאָרידזש;עס איז שווער צו קאָנטראָלירן די גאנצע פּראָצעס פון נידעריק טעמפּעראַטור בעשאַס די זאַמלונג און טראַנספּערטיישאַן פּראָצעס, און עס איז שווער צו ענשור די קוואַליטעט קאָנטראָל איידער מוסטער טעסטינג^[1-2].

רנאַסע (רנאַסע) איז אַן ענדאָנוקלעאַסע וואָס כיידראַליזיז רנאַ, דער הויפּט סעווערינג פאָספאָדיעסטער קייטן צווישן נוקלעאָטידעס.די רנאַסע מאַלאַקיול איז זייער סטאַביל, עס זענען דיסולפידע קייטן אין די סטרוקטור, און זייַן טעטיקייט טוט נישט דאַרפן די בייַזייַן פון דייוואַלאַנט קיישאַנז, אַזוי רנאַסע איז נישט לייכט דענאַטורעד, און עס איז גרינג צו רענאַטורע אפילו נאָך הויך טעמפּעראַטור אָדער די נוצן פון דענאַטורעאַנץ.רנאַסעס זענען צעטיילט אין ענדאָגענאָוס און עקסאָגענאָוס אָנעס.די ענדאָגענאָוס רנאַסעס קענען זיין באפרייט אין דער זעלביקער צייט ווען סעלז זענען ראַפּטשערד.דעריבער, ילימאַנייטינג די ראָלע פון ​​ענדאָגענאָוס רנאַסעס איז אַ זייער קריטיש שריט אין די רנאַ יקסטראַקשאַן פּראָצעס.עקסאָגענאָוס רנאַסעס זענען וויידלי פונאנדערגעטיילט.רנאַסעס עקסיסטירן אין די לופט, מענטש הויט, האָר און שפּייַעכץ, וואָס זענען וויכטיק סיבות פֿאַר די גרינג דערנידעריקונג פון רנאַ^[3].

דאַטאַ אָנפֿרעג

CANS-CL02-A009 "אַפּפּליקאַטיאָן פון מעדיציניש לאַבאָראַטאָריע קוואַליטי און קאַמפּאַטינס אַקרעדאַטיישאַן גיידליינז אין די פעלד פון מאָלעקולאַר דיאַגנאָסיס" אין די טעכניש רעקווירעמענץ לייגט אַז צונעמען וואַסער קוואַליטעט סטאַנדאַרדס זאָל זיין פארמולירט לויט די אַפּלאַקיישאַן;דיספּאָוזאַבאַל ערטייט קאַנטיינערז:

רנאַסע / קלאַסאַפאַקיישאַן

(1) רנאַסע א

ריבאָנוקלאַסע א (רנאַסע א), דערייווד פון באָווין פּאַנקרעאַס, איז אַן ענדאָריבאָנוקלאַסע וואָס קענען ספּאַסיפיקלי באַפאַלן די 3′ סוף פון פּירימידינע רעזאַדוז אויף רנאַ, קאַטינג סיטאָסין אָדער וראַסיל געשאפן דורך שכייניש נוקלעאָטידעס.פאָספאָדיעסטער בונד, די לעצט פּראָדוקט פון דער אָפּרוף איז אַ 3 ′ פּירימידינע נוקלעאָטידע און אַן אָליגאָנוקלעאָטידע מיט אַ 3 ′ פּירימידינע נוקלעאָטידע אין די סוף.

(2) רנאַסע ט1

Ribonuclease T1 (RNase T1) איז דערייווד פון Aspergillus orjzae, עס ספּאַסיפיקלי אקטן אויף די 3′-וואָקזאַל פאָספאַטע פון ​​גואַנין, און די קלעאַוואַגע פּלאַץ איז צווישן די 3′ פאָספאַטע פון ​​גואַנין און די 5′ הידראָקסיל פון שכייניש נוקלעאָטידעס.די לעצט פּראָדוקט פון דער אָפּרוף איז 3′גואַניליק זויער און אָליגאָנוקלעאָטידע פראַגמאַנץ מיט 3'גואַניליק זויער אין די סוף.

(3) רנאַסע ה

ריבאָנוקלאַסע ה (רנאַסע ה) איז געווען ערשטער דיסקאַווערד פֿון קאַלב טהימוס געוועב, און זייַן קאָדירונג דזשין איז קלאָונד אין Escherichia coli.עס קענען ספּאַסיפיקלי דיגרייד דנאַ: רנאַ סטראַנדז אין רנאַ כייבריד דופּלעקסאַז, ריזאַלטינג אין אָליגאָנוקלעאָטידעס און מאָנאָנוקלעאָטידעס מיט 3'-OH און 5'-מאָנאָפאָספאַטע ענדס, עס קען נישט דיגרייד איין- אָדער טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ אָדער רנאַ.

רנאַסע

פֿונקציע און נוצן

ריבאָנוקלעאַסע קענען קאַטאַליזירן די דערנידעריקונג פון ריבאָנוקלעיק זויער (רנאַ) און קענען זיין סינטאַסייזד קינסטלעך.מעדיסינאַל זאלבאלל איז געניצט טאָפּיקאַללי צו מייַכל טראַוומע און שלאָס ווייטיק.לויט צו ריפּאָרץ, ריבאָנוקלעאַסע קענען טוישן די מאַטאַבאַליזאַם פון די באַלעבאָס צעל, ינכיבאַט ווירוס סינטעז, ינכיבאַט די פּראָוליפעריישאַן פון ינפלוענציע ווירוס אין וויטראָ, און ינכיבאַט די פאָרמירונג פון וואַקסאַניאַ און הערפּעס ווירוס אין הינדל עמבריאָוז.קליניש נוצן פון ריבאָנוקלעאַסע טעגלעך ינטראַמוסקולאַר ינדזשעקשאַן פון 180 מג, וווילטויק פֿאַר די באַהאַנדלונג פון עפּידעמיע ענסעפאַליטיס, ריבאָנוקלעאַסע קענען קאַטאַליזירן די דערנידעריקונג פון ריבאָנוקלעיק זויער (רנאַ), און קענען איצט זיין אַרטאַפישאַלי סינטאַסייזד.מעדיסינאַל זאלבאלל איז געניצט טאָפּיקאַללי צו מייַכל טראַוומע און שלאָס ווייטיק.לויט צו ריפּאָרץ, ריבאָנוקלעאַסע קענען טוישן די מאַטאַבאַליזאַם פון די באַלעבאָס צעל, ינכיבאַט ווירוס סינטעז, ינכיבאַט די פּראָוליפעריישאַן פון ינפלוענציע ווירוס אין וויטראָ, און ינכיבאַט די פאָרמירונג פון וואַקסאַניאַ און הערפּעס ווירוס אין הינדל עמבריאָוז.קליניש נוצן פון ריבאָנוקלעאַסע טעגלעך ינטראַמוסקולאַר ינדזשעקשאַן פון 180 מג איז וווילטויק פֿאַר די באַהאַנדלונג פון עפּידעמיע ענסעפאַליטיס.

רנאַסע

ינכיבאַטער דעפֿיניציע

דעפֿיניציע פון ​​רנאַסע ינכיבאַטער אַפּאַראַט: די סומע פון ​​ענזיים פארלאנגט צו ינכיבאַט 50% פון די טעטיקייט פון 5נג רנאַסע א איז איין אַפּאַראַט.

ווי RNase ינכיבאַטערז אַרבעט

גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע:

גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע איז אַן אָרגאַניק קאַמפּאַונד מיט די מאָלעקולאַר פאָרמולע C2H6N4S.דער הויפּט געניצט אין בייאַלאַדזשיקאַל מעדיצין, כעמישער רייידזשאַנץ, אאז"ו ו. גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע איז אַ פּראָטעין ליסינג אַגענט, און עס איז אָפט געניצט ווי דער הויפּט קאָמפּאָנענט פון ליסיס לייזונג אין מאָלעקולאַר דיאַגנאָסטיק רייידזשאַנץ.עס קענען ליסירן געוועב, צעשטערן צעל סטרוקטור און דיססאָסיאַטע נוקלעיק זויער פון נוקלעאָפּרוטין, און האט אַ שטאַרק דינאַטוריישאַן צו רנאַסע.עס איז דערווייַל די מערסט עפעקטיוו רנאַסע ינכיבאַטער.

TRIzol איז אַ ראָמאַן גאַנץ רנאַ יקסטראַקשאַן רייידזשאַנט וואָס קענען גלייַך עקסטראַקט גאַנץ רנאַ פֿון סעלז אָדער געוועבן.עס כּולל סאַבסטאַנסיז אַזאַ ווי פענאָל און גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע, וואָס קענען ראַפּאַדלי צעשטערן סעלז און ינכיבאַט נוקלעאַסעס פריי דורך סעלז.

(אָבער, די גואַנידינע יסאָטהיאָסיאַנאַטע איז געפערלעך פֿאַר לאַב ריסערטשערז 'געזונט.)

רנאַסין:

זויער גלייקאָפּרעטעין יקסטראַקטיד פון שטשור לעבער אָדער מענטש בלאַסטאָדערם.רנאַסין איז אַ ניט-קאַמפּעטיטיוו ינכיבאַטער פון רנאַסע, וואָס קענען בינדן צו פאַרשידן רנאַסעס צו ינאַקטיווייט זיי.

(מער דעטאַילס: https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hהויך טעמפּעראַטור:

הויך טעמפּעראַטור איז אויך אַ פּראָסט מיטל פון פּראָטעין דינאַטוראַטיאָן.

דיעטהילפּיראָקאַרבאָנאַטע (DEPC):

דעפּק איז אַ שטאַרק אָבער דערענדיקט רנאַסע ינכיבאַטער, וואָס קענען ינכיבאַט רנאַסע טעטיקייט דורך קאַמביינינג מיט די אַמינאָ זויער ימידאַזאָלע רינג פון די רנאַסע אַקטיוו גרופּע צו דענאַטור פּראָטעינס.

וואַנאַדיל ריבאָנוקלעאָסידע קאָמפּלעקס:

א קאָמפּלעקס געשאפן דורך וואַנאַדיום אַקסייד ייאַנז און נוקלעאָסידעס, וואָס ביינדז צו רנאַסע אין די פאָרעם פון יבערגאַנג סאַבסטאַנסיז, וואָס קענען כּמעט גאָר ינכיבאַט די טעטיקייט פון רנאַסע

אנדערע:

SDS, ורעאַ, דייאַטאָמאַסע ערד, אאז"ו ו אויך האָבן אַ זיכער ינכיבאַטאָרי ווירקונג אויף רנאַסע.

עקספּערט באריכטן

לי יודזשיע הויפּט טעכניקער

דירעקטאָר פון לאַבאָראַטאָריע דעפּאַרטמענט, דזשיאַאָזשאָו האָספּיטאַל, דאָנגפאַנג האָספּיטאַל אַפיליייטאַד צו טאָנגדזשי אוניווערסיטעט

אין סדר צו פאַרמייַדן די בייאָודאַגריידיישאַן פון עקסאָגענאָוס רנאַסע, מאַסקס, גלאַווז און האַץ זאָל זיין וואָרן און ריפּלייסט אָפט בעשאַס די רנאַ יקסטראַקשאַן פּראָצעס.כל גלאַסווער מוזן זיין בייקט אין אַ דרייינג ויוון בייַ 200 ° C פֿאַר מער ווי 2 שעה.מאַטעריאַלס געניצט פֿאַר באַקינג, אַזאַ ווי פּלאַסטיק, דאַרפֿן צו זיין באהאנדלט מיט דעפּק וואַסער, און דעמאָלט געוואשן מיט דיסטילד וואַסער.די רייידזשאַנץ אָדער דעוויסעס געניצט פֿאַר יקסטראַקשאַן, פּרעזערוויישאַן און לעגיטימאַציע פון ​​רנאַ זאָל זיין דעדאַקייטאַד צו רנאַ, און אַ פרייַ רנאַ אָפּעראַציע געגנט זאָל זיין שטעלן אַרויף.

רעפערענצן:

[1] Smith-Vaughan HC, Binks MJ, Beissbarth J, et al.באַקטיריאַ און ווירוסעס אין די נאַסאָפאַרינקס גלייך איידער אָנסעט פון אַקוטע נידעריקער רעספּעראַטאָרי ינפעקשאַנז אין ינדיגענאָוס אַוסטראַליאַן קינדער [J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] שפּיטאָל ינפעקציע קאָנטראָל צווייַג פון כינעזיש פּרעווענטיוו מעדיסינע אַססאָסיאַטיאָן.גיידליינז פֿאַר זאַמלונג און דורכקוק פון קליניש מייקראָוביאַל ספּעסאַמאַנז [J].כינעזיש זשורנאַל פון האָספּיטאַל ינפעקציע, 2018 (20): 3192-3200.

[3] "קליניש טעסט צען טויזנט פארוואס מאָלעקולאַר ביאָלאָגי טעסט באנד"