דירעקט פּקר איז אַ אָפּרוף וואָס גלייך ניצט כייַע אָדער פאַבריק געוועבן פֿאַר אַמפּלאַפאַקיישאַן אָן נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן.אין פילע וועגן, דירעקט פּקר אַרבעט ווי רעגולער פּקר

דער הויפּט חילוק איז די מנהג באַפער געניצט אין דירעקט פּקר, דער מוסטער קענען זיין גלייך אונטערטעניק צו די פּקר אָפּרוף אָן נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן, אָבער עס זענען קאָראַספּאַנדינג רעקווירעמענץ פֿאַר די טאָלעראַנץ פון די ענזימעס און די קאַמפּאַטאַבילאַטי פון די באַפער ינוואַלווד אין די דירעקט פּקר אָפּרוף.

כאָטש עס זענען מער אָדער ווייניקער פּקר ינכיבאַטערז אין פּראָסט סאַמפּאַלז, דירעקט פּקר קענען נאָך דערגרייכן פאַרלאָזלעך אַמפּלאַפאַקיישאַן אונטער דער קאַמף פון ענזימעס און באַפערז.די בעקאַבאָלעדיק פּקר אָפּרוף ריקווייערז הויך-קוואַליטעט נוקלעיק זויער ווי אַ מוסטער, וואָס קענען ינכיבאַט די גלאַט פּראָגרעס פון פּקר אָפּרוף אויב די מוסטער כּולל פּראָטעינס און אנדערע ימפּיוראַטיז.דירעקט פּקר איז דערווייַל איינער פון די מערסט פאָלקס טעקנאַלאַדזשיז אין די פעלד פון מאָלעקולאַר דיאַגנאָסטיקס.

01 דירעקט פּקר איז ערידזשנאַלי געניצט פֿאַר כייַע און פאַבריק

די ערשטע אַפּלאַקיישאַן פון דירעקט פּקר איז אין די פעלד פון אַנימאַלס און געוויקסן, אַזאַ ווי בלוט, געוועב און האָר פון שטשור, קאַץ, הינדל, קיניגל, שעפּס, פיך, אאז"ו ו, פּלאַנט בלעטער און זאמען, אאז"ו ו.

די פעלדער האָבן עטלעכע פּראָסט פֿעיִקייטן, דאָס איז, דער ציל דזשין אינהאַלט איז לעפיערעך הויך און נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן איז טראַבאַלסאַם, אַזוי דירעקט פּקר קענען ניט בלויז שפּאָרן צייט און האָבן אַ קליין פּראַל אויף די רעזולטאַטן, אָבער אויך שפּאָרן קאָס.

דירעקט PCR געניצט פֿאַר פּאַטאַדזשאַן דיטעקשאַן איז אַ ענין פון לעצטע יאָרן, עטלעכע PCR רייידזשאַנט מאַניאַפאַקטשערערז האָבן געמאכט אַ פּלאַץ פון השתדלות אין דעם ריכטונג ווען מאכן כידעש.ספּעציעל אין דעם COVID-19 עפּידעמיע, פילע אַזאַ דיטעקשאַן פּראָדוקטן האָבן ארויס אויף דעם מאַרק, אַזאַ ווי סאַרס-קאָוו -2 נוקלעיק זויער דעטעקשאַן קיט (מולטיפּלעקס פּקר פלואָרעססענט פּראָבע מעטאַד) ריסערטשט און דעוועלאָפּעד דורך Foregene, וואָס ניצט רעאַל-צייט RT PCR טעכנאָלאָגיע (ררט-פּקר) פֿאַר קוואַליטאַטיווע דיטעקשאַן פון סאַרס-קאָהאַרינס אָדער סאַרס-קאָהאַרגינאַל סאַמפּאַלז. ס.

Foregene איז איינער פון די קאָמפּאַניעס וואָס נוצן דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע, פֿאַר די דיטעקשאַן פון נאָרמאַל ORF1ab, N, E אוןוואַריאַנט לינעאַגע נוקלעיק אַסאַדז אין מענטשלעך נאַסאָפאַרינגעאַל אָדער אָראָפאַרינגעאַל סאַמפּאַלז אַזאַ ווי סאַרס-קאָוו-2 ב.1.1.7 ייכעס (וק), ב.1.351 ייכעס (זאַ), ב.1.617 ייכעס (IND) און פּ.1 ייכעס (בר).

02  רעאַגענץ דארף פֿאַר דירעקט פּקר

מוסטער ליסאַטע

די מוסטער ליסאַטע קענען זיין קאַנפיגיערד דורך זיך אָדער פּערטשאַסט.דער חילוק אין דער זאַץ פון פאַרשידענע בראַנדז פון ליסאַטע וועט מאַכן די ליסינג פיייקייט אַנדערש, און די ליסינג צייט וועט זיין אַ ביסל אַנדערש.למשל, פֿאַר דער צוגרייטונג פון כייַע געוועב סאַמפּאַלז, 30 מינוט אָדער יבערנאַכטיק ליסיס איז בכלל רעקאַמענדיד, און די ליסיס לייזונג פֿאַר ווירוסעס ריינדזשאַז 3-10 מינוט.

פּקר בעל מישן

עס איז רעקאַמענדיד צו נוצן הייס-אָנהייב דנאַ פּאָלימעראַסע צו פאַרבעסערן ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן און פאַרגרעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן פיייקייט.די האַרץ פון דירעקט פּקר איז אַ העכסט טאָלעראַנט פּאָלימעראַסע.

עלימינירן אָדער ינכיבאַט קאַמפּאָונאַנץ אין דער מוסטער וואָס ווירקן דנאַ אַמפּלאַפאַקיישאַן

נאָך די מוסטער איז פּראַסעסט מיט די ליסאַטע, פּראָטעינס, ליפּידס און אנדערע צעל דעבריס וועט זיין באפרייט, די סאַבסטאַנסיז וועט ינכיבאַט די פּקר אָפּרוף.דעריבער, דירעקט פּקר ריקווייערז די אַדישאַן פון קאָראַספּאַנדינג באַזייַטיקונג אָדער ינכיבאַטערז צו רעדוצירן די השפּעה פון די סיבות.

03  א זאַמלונג פון פינף וויסן פונקטן פון דירעקט PCR

ערשטער, דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע איז אַ דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע פֿאַר פאַרשידן בייאַלאַדזשיקאַל סאַמפּאַלז.אונטער דעם טעכניש צושטאַנד, עס איז ניט דאַרפֿן צו צעטיילן און עקסטראַקט די נוקלעיק זויער, גלייך נוצן די געוועב מוסטער ווי די כייפעץ, און לייגן די ציל דזשין פּרימערז צו דורכפירן די פּקר אָפּרוף.

רגע, דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע איז ניט בלויז אַ טראדיציאנעלן דנאַ מוסטער אַמפּלאַפאַקיישאַן טעכנאָלאָגיע, אָבער אויך כולל רנאַ מוסטער פאַרקערט טראַנסקריפּציע פּקר.

דריט, דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע ניט בלויז גלייך פּערפאָרמז רוטין קוואַליטאַטיווע פּקר ריאַקשאַנז אויף געוועב סאַמפּאַלז, אָבער אויך ינקלודז פאַקטיש-צייט qPCR ריאַקשאַנז, וואָס ריקווייערז די אָפּרוף סיסטעם צו האָבן שטאַרק אַנטי-הינטערגראָונד פלואָרעססענסע ינטערפיראַנס פיייקייט און ענדאָגענאָוס פלואָרעססענסע קווענטשערז די אַנטאַגאַנאַסץ פיייקייט.

פערט, די סאַמפּאַלז טאַרגעטעד דורך די דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע נאָר דאַרפֿן די מעלדונג פון נוקלעיק זויער טעמפּלאַטעס, און טאָן ניט באַזייַטיקן פּראָטעינס, פּאַליסאַקעריידז, זאַלץ ייאַנז, אאז"ו ו וואָס אַרייַנמישנ זיך מיט די פּקר אָפּרוף.וואָס ריקווייערז די נוקלעיק זויער פּאָלימעראַסע און פּקר מיקס אין די אָפּרוף סיסטעם צו האָבן ויסגעצייכנט קעגנשטעל און אַדאַפּטאַבילאַטי צו ענשור ענזיים טעטיקייט און רעפּלאַקיישאַן אַקיעראַסי אונטער קאָמפּלעקס טנאָים.

פינפט, די געוועב מוסטער טאַרגעטעד דורך דירעקט פּקר טעכנאָלאָגיע אָן קיין נוקלעיק זויער ענריטשמענט באַהאַנדלונג און די סומע פון ​​מוסטער איז זייער קליין, וואָס ריקווייערז די אָפּרוף סיסטעם צו האָבן גאָר הויך סענסיטיוויטי און אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט.